Общий анализ крови

(трактовка результатов исследований, выполненных

на гематологических анализаторах)
Ю.В. Первушин, * С.А. Луговская,**, Л.А. Марченко*, В.Н. Иванова*
* ГОУ ВПО Ставропольская государственная медицинская академия Росздрава, кафедра клинической лабораторной диагностики ФПО,

**ГОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования, кафедра клинической лабораторной диагностики.

Сравнительно недавно только единичные клинико-диагностические лаборатории (КДЛ) имели возможность проводить гематологические исследования на автоматических анализаторах. Исследования крови выполняемые «ручными» методами имели большие погрешности, не было лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), в которых бы регулярно не высказывали претензий к качеству лабораторных исследований и, особенно, к исследованию крови. В настоящее время произошли кардинальные изменения. Многие крупные ЛПУ смогли оснастить КДЛ современными гематологическими анализаторами. В рамках приоритетного национального проекта «Здоровье» в КДЛ первичного звена здравоохранения поступили наборы лабораторного оборудования, включающие гематологические анализаторы. Таким образом, гематологические анализаторы появились - в городских, районных и детских поликлиниках, поликлинических отделениях центральных городских и районных больниц.

В настоящее время, рациональное использование лабораторного оборудования, поступающего в рамках Национального проекта, возможно, только при достаточной подготовленности врачей первичного звена здравоохранения и всех врачей клинических дисциплин к правильной трактовке получаемых результатов лабораторного исследования. Врачи должны ясно представлять себе:

• 
  возможности нового оборудования
  
• 
  трактовку результатов исследований,
  
• 
  те погрешности, которые могут возникать в процессе проведения анализа,
  
• 
  возмущающее влияние различных факторов (лекарственные препараты, лечебные процедуры, физические нагрузки, физиологические состояния и многие другие воздействия) на результаты лабораторных исследований.
  

Преимуществами автоматического анализа крови являются:

• 
  высокая производительность (до 100 и более проб в час),
  
• 
  небольшой объем крови (12-50 мкл),
  
• 
  оценка более 20 показателей, вместо 10-12 при обычном анализе крови,
  
• 
  внедрение в практику лабораторных исследований новых показателей, существенно расширяющих возможности диагностики,
  
• 
  графическое представление распределения клеток (гистограммы, скетограммы),
  
• 
  высокая точность исследования, так как подсчету подвергаются несколько тысяч клеток из одной пробы.
  

Оценивать результаты исследо­ваний крови, полученные на гемато­логическом анализаторе, необходи­мо в контексте с клиническими данными и состоянием больного. Следует помнить, что изменения клеточного состава могут наблю­даться, как при различных физио­логических состояниях организма, так и вследствие проводимых лечеб­ных и диагностических воздействий, оперативных вмешательств, лекар­ственного лечения, а также следует учитывать тяжесть процесса, реак­тивность больного, сопутствующие осложнения.

Контроль преаналитических факторов в гематологических исследованиях является ключевым для обеспечения качественных результатов тестов. Такие преаналитические характеристики, как взятие пробы, транспортировка и хранение образца, влияние лекарственных препаратов, а также факторы, связанные с подготовкой пациента, могут привести к неверным или неточным результатам анализов и, следовательно, к постановке ошибочного диагноза, что может повлечь за собой риск для здоровья пациента. Снижение числа ошибок на любой стадии преаналитического этапа может существенно улучшить качество гематологических анализов, снизить количество повторных проб и сократить расходы рабочего времени и средств, выделяемых на обследование пациентов. Одна из задач, стоящих перед врачом-клиницистом довести до сведения пациента правила подготовки к взятию крови и обеспечить правильность взятия крови процедурными медицинскими сестрами в отделениях.

При плановом назначении лабораторного теста кровь следует брать натощак (после примерно 12 ч голодания, воздержания от приема алкоголя и курения), между 7 и 9 ч утра, при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20—30 мин), в положении пациента лежа или сидя.

Лучшим материалом для клинического исследования крови является венозная кровь. Это обусловлено тем, что при известной стандартизации процессов взятия, хранения, транспортировки крови удается добиться минимальной травматизации и активации клеток, примеси других веществ (тканевой жидкости), при этом всегда имеется возможность повторить и/или расширить анализ (например, добавить исследование ретикулоцитов).

Взятие венозной крови облегчается применением закрытых вакуумных систем. Метод взятия крови с помощью закрытых вакуумных систем имеет ряд преимуществ, основными из которых являются обеспечение высокого качества пробы и предотвращение любого контакта с кровью пациента, а значит, обеспечение безопасности медицинского персонала и других пациентов.

Пункция кожи с целью получения капиллярной крови является процедурой выбора, если требуется взять небольшое количество крови. Для гематологических исследований капиллярную кровь рекомендуется брать в следующих случаях: при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента; при наличии у пациента мелких или труднодоступных вен; при выраженном ожирении пациента; при установленной склонности к венозному тромбозу; у новорожденных.

При трактовке результатов исследований проведенных на гематологическом анализаторе мы рекомендуем пользоваться принятыми в Российской Федерации нормами (табл. 1). Весьма желательно, чтобы во все гематологические анализаторы были введены именно эти показатели нормальной гемограммы.

Таблица 1.

Нормальные показатели периферической крови у взрослых

Показатель	Нормальные значения
	мужчины	женщины
RBC, эритроциты х 1012/л	4,0-5,0	3,9-4,7
HGB, гемоглобин, г/л г/дл	130,0-160,0	120,0-140,0
	13,0-16,0	12,0-14,0
НСТ, гематокрит,%	40-48	36-42
MCV, средний объем эритроцита, фл, мкм3	80,0-100,0
MCH, cреднее содержание гемоглобина в эритроците, пг	27,0-31,0
MCHC, средняя концентрация % гемоглобина в эритроците, г/л	30,0-38,0 300 - 380
RDW, ширина распределения RBC по объему	11,5-14,5%
Ретикулоциты,‰	2,0-10,0
WBC, лейкоциты х 109/л	4,0-9,0
Нейтрофилы, %,(109/л): палочкоядерные сегментоядерные	1,0-6,0 (0,040-0,300) 47,0-72,0 (2,000-5,500)
Эозинофилы %,(109/л)	0,5-5,0 (0,020-0,300)
Базофилы %,(109/л)	0-1,0 (0-0,065)
Лимфоциты %,(109/л)	19,0-37,0 (1,200-3,000)
Моноциты %,(109/л)	3,0-11,0 (0,090-0,600)
Плазматические клетки	-
Тромбоциты х 109/л	180,0-320,0
СОЭ, мм/час	2,0-10,0	2,0-15,0

Само исследование крови в гематологических анализаторах имеет ряд особенностей. Так перед анализом вся кровь разделяется на две части.

Первая часть разводится дилюентом и происходит подсчет всех клеток содержащихся в растворе. Клетки объемом менее 30 фл подсчитываются и рассматриваются как тромбоциты, все остальные клетки – как эритроциты. Поскольку размеры лейкоцитов близки к размерам эритроцитов, разделить их не удается. При использовании кондуктометрических счетчиков в подсчет эритроцитов неизбежно будут входить лейкоциты. Таким образом, в анализе гематологического анализатора в графе эритроциты (RBC), практически оказывается сумма RBC и лейкоцитов (WBC). Однако, за исключением явных лей­коцитозов, их вклад будет чрезвычайно мал, так как в норме концентрация эритроцитов в крови на 3 порядка превышает концентрацию лейкоцитов.

Например, при содержании RBC 5 х10¹²/л и WBC 5х10⁹л анализатор определит общее количество RBC – 5,005 х10¹²/л и ошибка составит всего 0,1%, что значительно ниже, чем ошибка самого прибора.

Только, при значительном увеличении числа WBC ошибка подсчета RBC прогрессивно нарастает, а при лейкоцитозе более 50*10⁹/л может искажаться и показатель объема эритроцитов (MCV).

Ко второй части крови добавляется лизирующий реактив. Он вызывает полный гемолиз эритроцитов, после чего все подсчитанные клетки объемом более 35 фл идентифицируются, как лейкоциты. В этой же порции фотометрические определяется содержание гемоглобина (HGB).
Клиническое значение определения основных

показателей эритроидного ростка

Клиническое значение определения основных показателей эритроидного ростка – эритроцитов (RGB), гемоглобина (HGB) и гематокрита (HCT) давно и подробно описано и хорошо известно врачам-клиницистам, и потому на этих показателях подробно останавливаться не будем. Отметим только, что при определении на гематологическом анализаторе RBC возможны ошибки измерения.

Ложнозавышенные результаты анализа RBC наблюдаются при нали­чии в крови:

• гигантских тромбоцитов (с объемом более 30 фл);

• криоглобулинов

Ложное занижение результатов определения RBC может быть следствием:

• агглютинации эритроцитов;

• выраженного микроцитоза эритроцитов (тогда они воспринимаются аналиазатором,как тромбоциты).

Завышение результатов при определении HGB наблюдается при:

• 
  высоких лейкоцитозах (более 50х10⁹/л);
  
• 
  гиперлипидемии;
  
• 
  гипербилирубинемии;
  
• 
  присутствии нестабильных гемоглобинов (Hb S, НЬ С);
  
• 
  криоглобулинемии.
  

Следует учитывать, что если нестабильные гемоглобины и криоглобулинемия встречается не слишком часто, то первые три пункта нередко могут существенно исказить результаты выполненного исследования.
Так в одну из больниц города Ставрополя в отделение интенсивной терапии поступила больная С-ва в тяжелом состоянии с выраженной гипергликемией и явлениями кетоацидоза. При исследовании гемограммы получен следующий результат:
Анализ ОИТАР-1 Время 10:16

Дата: 19/01/2007 С____ВА

Номер: 119

Т: 26.9 С

WBC : 22,1 H 10³/mm³ ( 4,0 - 9,0) MCV : 89 μm³ (75 - 95)

RBC : 4,06 10⁶/mm³ (3,9- 5,0) MCH : 52,2 H pg (24 – 34 )

HGB : 21,2 H g/dl (12,0-16,0) MCHC: 58,7 H g/dl (30,0-38,0)

HCT : 36,1 % (36,0 -48,0) RDW : 14,3 % (11,5-14,5)

PLT : 387 10³/mm³ ( 150 - 400) MPV : 8 μm³ ( 7,4-10,4)

PCT : .311 % (.150- .400) PDW : 12,9 % (10,0-20,0)

WBC флаги : G1; G2

Диф. :

%LYM: 17,5 L % (19,0 - 37,0) #LYM: 3,8 H 10³/mm³ (1,2-3,0)

%MON: 6,1 % (3,0 - 11,0) #MON: 1,3 H 10³/mm³ (0,1-0,6)

%GRA: 76,4 H % (47,0-72,0) # GRA: 17,0 H 10³/mm³ (2,0-5,5)

При оценке результатов обследования обращает на себя внимание не только чрезвычайное повышение HGB (до 212 г/л) и связанных с ним индексов MCH и MCHC (последний до невероятных величин), но и относительно нормальные показатели RBC и HCT. Все это бесспорно свидетельствовало об ошибке при определении HGB. Причиной ошибки явилась выраженная мутность («хилезность») сыворотки как следствие гипертриглицеридемии и повышения в сыворотке липопротеинов очень низкой плотности. Если бы в КДЛ не поступила кровь для биохимического исследования и не была бы получен сыворотка, вопрос о причинах ошибки мог бы остаться невыясненным. Аналогичные примеры можно привести и у больных с гипербилирубинемией – при желтухах различной этиологии.
НСТ в гематологических анализаторах не определяется, а рассчитывается, исходя из показателей RBC и MCV. Он представлен суммой прямо измеренных объемов эритроцитов в единице объема крови. Таким образом, не существует проблемы "оста­точной" плазмы (плазмы оставшейся между эритроцитами при центрифугировании). Но именно поэтому результаты определения гематокрита методом центрифугирования (в гематокритной центрифуге, но не в пробирке – последнее запрещено!) и данные, полученные при исследовании гематологическим анализатором, будут отличаться. А, следовательно, для получения сравнимых результатов, желательно в процессе обследования пациента пользоваться каким-то одним из этих двух методов.

Кроме этого на результаты исследования HCT оказывает существенное влияние разведение крови изотоническим раствором, в котором эритроцит принимает оптимальный объем, отличающийся от того, который он имел в крови сосудистого русла. Существенные отличия будут в том случае, если у больного при взятии крови наблюдалось повышение или снижение осмотического давления плазмы (что нередко наблюдается у больных реанимационных отделений).

Возможные ошибки измерения.

Ложнозавышенные результаты HCT могут наблюдаться при:

• 
  криоглобулинемии;
  
• 
  присутствии гигантских тромбоцитов;
  
• 
  гиперлейкоцитозе (>50х10⁹/л);
  
• 
  гипергликемии (> 33 ммоль/л или >600 мг/дл)
  
• 
  диабетическом кетоацидозе.
  

В двух последних случаях имеется гиперосмолярность плазмы. При разведении крови в анализаторе изотоническим раствором происходит быстрое набухание эритроцитов, что и вызывает завышение HCT. В этих случаях определение гематокрита методом центрифугирования более надежно.

К ложному занижению результатов HCT приводят агглютинация эритроцитов и выраженный микроцитоз (< 36 фл) эритроцитов.
ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ ИНДЕКСЫ

Широкое использование эритроцитарных индексов стало возможным только после выполнения исследований на гематологических анализаторах. Эритроцитарные индексы позволяют значительно повысить качество диагностики анемического синдрома.

MCV (mean corpuscular volume) - средний объем эритроцита, выражается в кубических мик­рометрах (мкм³) или в фемтолитрах (1фл = 1мкм³). MCV определяется большинством гематоло­гических анализаторов. Вычисляется MCV делением суммы клеточных объемов на число эритроцитов.

MCV - это средний показатель объема всей популяции клеток. Поэтому необходимо иметь в виду, что MCV может иметь нормальное значение при наличии у пациен­та одновременно выраженного макро- и микроцитоза. В этом случае особую диагностичес­кую важность приобретает анализ гистограмм.

MCV меняется в течение жизни: у новорожденных достигает 128 фл, в первую неделю снижается до 100-112 фл, к году составляет 77-79 фл, в возрасте 4-3 лет нижняя граница нормы (80 фл) стабилизируется. MCV у взрослых ниже 80 фл оценивается как микроцитоз, выше 100 фл, как макроцитоз.
Возможные ошибки измерения.

Ложное завышение MCV может происходить в случаях:

• присутствия холодовых агглютининов. Агглютинаты эритроцитов воспринимаются при­бором как одна большая клетка, если их размер меньше верхнего порога эритроцитарного ка­нала. Сохранение in vitro и измерение таких проб при 37°С способствует получению правиль­ных результатов.

• диабетического кетоацидоза вследствие гиперосмолярности плазмы и быстрого набухания эритроцитов (увеличения объема) при разведении изотоническим раствором.

Относительное снижение MCV может быть при повышенном содержании фрагментов эритроцитов в крови вследствие механического гемолиза, коагулопатии потребления и других причин.

Клиническое значение. С клинической точки зрения этот показатель является важным абсолютным показателем. Этот показатель является более чувствительным, чем визуальная оценка диаметра эритроцитов, зависящая от формы клетки. Так изменение диаметра клетки на 5%, приводит к изменению MCV на 15%.

При трактовке анализа, следует учитывать, что:

• 
  ретикулоцитоз – увеличивает показатель MCV;
  
• 
  микросфероциты имеют диаметр меньше нормы, но при этом MCV чаще остается в норме;
  
• 
  MCV нельзя достоверно определить при большом количестве аномальных эритроцитов (например при серповидно-клеточной анемии; выраженном пойкилоцитозе);
  
• 
  при выраженном анизоцитозе эритроцитов, когда в крови присутствуют микро- и макроциты, MCV являясь средним показателем объема всей популяции клеток, может иметь нормальные значения.
  

В связи с этим при диагностике анемий абсолютно необходимо параллельно с исследованием индексов эритроцитов изучать мазки периферической крови и подробно описывать морфологию клеток.

MCV увеличен при макро- и мегалоцитарных анемиях, при анемиях после кровопотери, хронической гемолитической анемии, а также при алкоголизме, диффузных поражениях печени, гипотиреозе, диссеминированных злокачественных новообразованиях (метастазирование опухоли). Особенно высоки значения MCV при В₁₂-дефицитных анемиях.

Нормальные величины MCV при нормоцитарных анемиях – анемии при хронических заболеваниях, апластические, гемолитические анемии, анемии после кровотечений. Кроме этого нормоцитозом могут сопровождаться миелодиспластические синдромы.

Снижение MCV характерно для микроцитарных анемий: прежде всего железодефицитной анемии, талассемии. Могут сопровождаться микроцитозом гемолитические анемии, гемоглобинопатии, иногда при гипертиреозе.

МСН (mean corpuscular hemoglobin) - среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг). Характеризует среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците в абсолютных единицах. МСН - более объективный параметр, чем устаревший цветовой показатель, который не отражает синтез гемоглобина и его содержание в эритроците.

Возможные ошибки измерения. Параметр МСН является расчетным, поэтому к ложнозавышенным результатам приводят все факторы, влияющие на завышение значений гемоглобина и занижение количества эритроцитов.

Ложнозаниженные результаты МСН получаются вследствие ошибок, связанных с неправильным определением числа эритроцитов (завышения их количества).

Клиническое значение. Изменения МСН лежат в основе разделения анемий на нормохромные (27-31 пг), гипохромные (< 27 пг) и гиперхромные (> 31 пг). Снижение наблюдается при железодефицитных анемиях, повышение – при макроцитарных и особенно мегалобластных анемиях.

МСНС (mean corpuscular hemoglobin concentration) - средняя концентрация гемоглобина в эритроците (г/дл; г/л; %). Показатель МСНС отражает степень насыщения гемоглобином эритроцита или соотношение содержания гемоглобина к объему клетки. Снижение значения МСНС наблюдается при заболеваниях, сопровождающихся нарушени­ем синтеза гемоглобина. Увеличение же параметра МСНС выше нормальных значений свидетельствует об ошибках, допущенных при измерении данной пробы (погрешности определения гемоглобина или MCV), т.к. превышение концентрации гемоглобина выше определенного фи­зиологического уровня привело бы к разрушению (гемолизу) эритроцитов, чего не наблюдалось в данной пробе. Таким образом, данный параметр может быть использован как индикатор ошибок, допущенных на аналитическом или преаналитическом этапах работы.

Возможные ошибки измерения. Поскольку параметр МСНС является расчетным, то к ложнозавышенным результатам приводит любая неточность, связанная с определением гемоглобина, эритроцитов, гематокрита, поэтому этот показатель может быть использован, как индикатор ошибки прибора (в т.ч. и гематологического анализатора) или подготовки пробы к исследованию. Уровень MCHC выше 38% является показателем необходимости повторения анализа или следствием грубой ошибки при его выполнении (см. пример с гипертриглицеридемией).

Нормальные величины колеблются от 30 до 38 % (г/дл) или 300-380 г/л. Повышение MCHC выше 38% встречается крайне редко (наследственный сфероцитоз).

Клиническое значение. В отличии от среднего содержания гемоглобина в эритроците, МСНС не зависит от среднего клеточного объема и является чувствительным тестом оценки нарушения синтеза гемоглобина.

Снижение показателя отражает абсолютную гипохромию и является характерным для железодефицитной анемии. Чувствительность MCHC при железодефицитных анемиях составляет около 85%.

Снижен показатель и при макроцитарных и особенно мегалоцитарных анемиях, т.к. увеличение объема эритроцита не соответствует увеличению в них концентрации Hb.

Низкие значения этого показателя при нормальном или слабо пониженном содержании гемоглобина в крови указывает на наличие гипотонии плазмы и увеличении объема эритроцита.

следующая страница>