УДК 57.083.3
ПУТИ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ
ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
Людмила Викторовна СЕРДЮК1, Светлана Ивановна ЛЕЩУК1,
София Марковна ПОПКОВА1, Галина Валерьевна ЮРИНОВА2,
Елена Борисовна РАКОВА1
1 ФГБУ Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН
664025, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16
2 ФГБОУ ВПО Иркутский государственный университет Минобрнауки России
664003, г. Иркутск, ул. Карла Маркса, 1
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) остается по-прежнему в арсенале диагностических тестов исследователей, поскольку как в медицинской, так и в ветеринарной практике зарекомендовала себя с хорошей стороны за счет сочетаемости высокой специфичности и экономичности. Однако имеющиеся на вооружении лабораторий диагностикумы, к сожалению, отличаются низкой чувствительностью и небольшим сроком хранения. В данной работе предлагаются и рассматриваются некоторые методы совершенствования иммунодиагностических систем для РНГА по двум основным направлениям: использование конъюгирующего компонента, усиливающего адсорбционные свойства носителя (эритроцита) и способствующего увеличению срока хранения, а также подбор высокоактивного антигена для сенсибилизации эритроцитов, повышающего чувствительность диагностикума. В работе анализируются результаты испытания диагностикумов с водорастворимым полимером поли-1-винилимидазолом, используемым в качестве конъюгата, в сравнении с традиционным конъюгатом хлористым хромом, производится оценка антигенной активности разных фракций микробных клеток при иммунизации животных и в составе диагностикумов, обосновываются преимущества применения новых компонентов диагностикумов. Установлено, что применяемая технология способствует улучшению качественных характеристик эритроцитарного диагностикума: специфичности, чувствительности, срока хранения, воспроизводимости результатов.
Ключевые слова: эритроцитарный иммунодиагностикум, антиген, клеточные фракции, синтетический полимер, антитело.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Анненков В.В., Лещук С.И., Попкова С.М. и др. Современные подходы к конструированию препаратов в иммунотехнологии // Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2004. (9). 50–54.
2. Анненков В.В., Мазяр Н.Л., Круглова В.А. и др. Исследование взаимодействия полиакриловой кислоты с поли-1 винилазолами // Высокомолекулярные соединения. Сер. А. 1999. 41. (2). 357–362.
3. Анненков В.В., Мазяр Н.А., Лещук С.И. и др. Взаимодействие бычьего сывороточного альбумина с поли-N-винилазолами // Высокомолекулярные соединения. Сер. А. 2000. 42. (11). 1804–1810.
4. Каральник Б.В. Эритроцитарные реагенты в клинической иммунологии // Иммунология. 1995. (6). 4–6.
5. Кокорев В.С. Методология повышения диагностической эффективности вирусных препаратов. Екатеринбург, 2000. 350 с.
6. Никитин В.М. Справочник методов иммунологии. Кишинев: Штиинца, 1982. 304 с.
7. Николаева Т.Н., Бондаренко В.М., Николаева А.И. и др. Иммуномодулирующий эффект белковых фракций, выделенных из бифидобактерий // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2004. (2). 60–64.
8. Пат. 2009126306 РФ. Способ получения эритроцитарного антигенного диагностикума / С.И. Лещук, В.В. Анненков, С.М. Попкова, Л.В. Сердюк; Опубл. 08.07.2009.
9. Пат. 2499483 РФ. Способ получения эритроцитарного антигенного диагностикума / С.И. Лещук, Е.Н. Даниловцева, Л.В. Сердюк и др.; Опубл. 20.09.2011.
10. Петров Р.В., Хаитов Р.М. Коньюгированные полимер-субъединичные иммуногены и вакцины // Вестн. РАМН. 2003. (1). 10–14.
11. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Современные представления о механизмах действия полиоксидония // Иммунология. 2005. (4). 197–199.
12. Шмелева Е.А. Биологическая функция антигенов клеточной стенки C. diphtheriae и научно-производственная разработка иммуномодулирующего препарата «Кодивак»: автореф. дис. … докт. биол. наук. М., 1992.
13. Юринова Г.В. Совершенствование технологии приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с использованием синтетических полимеров: дис. … канд. биол. наук. Улан-Удэ, 2005.
14. Andrianov A.K., De Collibus D.P., Gillis H.A. et al. Poly[di(carboxyphenoxy)phosphazene] is a potent adjuvant for intradermal immunization // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009. 106. 18936–18941.
15. Barakat A.M.A., Abd Elaziz M.M., Fadaly H. A. Comparative diagnosis of toxoplasmosis in Egyptian small ruminants by indirect hemagglutination assay and ELISA // Global Veterinaria. 2009. 3. (1). 9–14.
16. Nakarin J., Pradutkanchana S. Evaluation of enzyme-linked immunosorbent assay and indirect hemagglutination assay for detection of leptospiral antibody by using three different antigens // J. Med. Assoc. Thai. 2004. 87. (10). 1218–1224.
17. Rubinsky-Elefant G., Hoshino-Shimizu S., Mamizuka E.M., Asciutti M.M.R. Improvement of the indirect hemagglutination test for the detection of antibodies to Streptococcus pyogenes // Braz. J. Med. Biol. Res. 1998. 31. 1081–1089.
18. Tagliabue A., Rappuoli R. Vaccine adjuvants: the dream becomes real // Hum. Vaccin. 2008. 4. 347–349.
19. Weinbach R. Die Verwen di barkeit formol behandelter Erythrozyten als Antigen-Täдger in der indirekten Hämagglutination // Z. Allerg. Path. 1959. 22. 1–8.
Leshchuk S.I. – doctor of biological sciences, leading researcher of the laboratory of microecology,
e-mail: [email protected]
Popkovа S.M. – doctor of biological sciences, head of laboratory of microecology, e-mail: [email protected]
Yurinova G.V. – candidate of biological sciences, associate professor of the chair for physical and chemical biology, e-mail: [email protected]
Rakova E.B. – candidate of biological sciences, researcher of the laboratory of microecology,
e-mail: [email protected]
Сердюк Л.В. – к.б.н., научный сотрудник лаборатории микроэкологии, e-mail: radugarose@yandex.ru
Лещук С.И. – д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории микроэкологии,
e-mail: leschuk.swet@yandex.ru
Попкова С.М. – д.б.н., руководитель лаборатории микроэкологии, e-mail: [email protected]
Юринова Г.В. – к.б.н., доцент кафедры физико-химической биологии, e-mail: yurinova@yandex.ru
Ракова Е.Б. – к.б.н., научный сотрудник лаборатории микроэкологии, e-mail: [email protected]