Определение антителообуазуюших клеток. Индекс стимуляции иммунного ответа высчитывали, как отношение числа АОК в селезенке мышей, получивших вермитокс в дозе 3,5 мкл/гол, к числу АОК в селезенке контрольных мы-шей. Установили влияние препарата на АОК в селезенке при иммунизации эритроцитами барана (таблица 13).

Таблица 13. Динамика АОК (клеток/мкл)

Препарат	Кол-во животн­ых	Доза, мкл/гол.	Число спленоци­тов на всю селезенку в млн.	Число АОК на всю		Р
				селезенку	на 106 сплено­цитов
Вермитокс	10	3,5	190,4±11,4	6,1±1,3	10,5±2,3	<0,05
Контроль	10	-	221,6±19,6	6,5±0,3	10,7±1,3

Содержание спленоцитов в селезенке мышей под влиянием вермитокса снизилось на 0,94 раза. Число АОК на всю селезенку снизилось в 0,9 раз, на 106 спленоцитов - в 0,98 раз, что указывают на отсутствие трансформации В-лимфоцитов в АОК селезенки.

При оценке действия вермитокса в дозе 3,5 мкл/гол на гуморальный иммунитет изучали его влияние на индуктивную и продуктивные фазы.

Кинетика В-лимфоиитов. Исследования проводили на 10 и 15 дни после последнего введения вермитокса в дозе 3,5 мкл/гол. В динамике относительного количества В-лимфоцитов наблюдали незначительное снижение ЕАС - РОК на 10-15-е дни после введения препарата до 15,8±0,7-16,2±0,3% по сравнению с контролем 16,3±1,4% (табл. 14).

Таблица 14. Кинетика относительного количества В-лимфоцитов (%) в крови интактных мышей после введения вермитокса в дозе 3,5 мкл/гол.

№	Доза препарата	Кратность	10-й день	15-й день
1	3,5 мкл/гол.	3	15,8±0,7	16,2±0,3
2	Контроль	-	16,3±0,4	16,1±1,7

Материалы по изучению вермитокса в дозе 3,5 мкл/гол показали, что препарат относится индифферентно к организму хозяина, т.е. не угнетает иммунный ответ (таблица 14).

5.2. Установление терапевтической дозы вермитокса

Опыты по испытанию вермитокса в дозах 2,5, 3,0 3,5 мкл/гол провели в приусадебном хозяйстве в июне-июле. Первоначально провели титровку терапевтической дозы на 20 ягнятах 4-5 мес. возраста, со средней живой массой 20 кг. Из животных сформировали 4 группы. Ягнятам 1-ой группы ввели вермитокс в дозе 2,5 мкл/гол; 2-ой 3,0 мкл/гол; 3-ьей группе ввели препарат в дозе 3,5 мкл/гол. Ягнята 4-ой группы препарат не получали и служили контролем (табл. 15). В результате 100% эффект получили только в дозе 3,5 мкл/гол, а дозы 2,5 и 3,0 мкл/гол дали, соответственно, 60 и 80% эффект.

Таблица 15. Определение оптимальной дозы вермитокса при мониезиозе ягнят

№ группы	Препарат	Доза мкл/гол.	Количество ягнят гол.	Возраст ягнят мес.	Зараженность ягнят мониезиями, %		Эффективность, %
					до лечения	после лечения
1	Вермитокс	2,5	5	4	100	100	60
2		3,0	5	4	100	100	80
3		3,5	5	4	100	100	100
4	Контроль	-	5	4	100	100	0

Для выявления интенсивности инвазии убили и провели гельминтологическое вскрытие желудочно-кишечного тракта по 3 ягнят из каждой группы (таблица 16). У контрольных ягнят обнаружили в среднем 1, 4, 3 мониезии на гол, у ягнят, получивших вермитокс в дозе 2,5 и 3,0 мкл/гол, обнаружили по одной цестоде. У ягнят леченых вермитоксом в дозе 3,5 мкл/гол мониезии не обнаруживали.

Таблица 16. Результаты гельминтологического вскрытия ягнят

Препарат	Кол-во животных	Доза препарата, мкл/гол.	Обнаружено, экз.
			М. expansa	М. benedeni
Вермитокс	3	2,5	1	-
	3	3,0	1	-
	3	3,5	-	-
Контроль	3	-	5	3

Клиническое исследование ягнят позволило установить, что животные легко переносят этот препарат, сохраняя аппетит и общий тонус организма (таблица 16).

5.3. Эффективность вермитокса при мониезиозе в производственных условиях

Антигельминтную эффективность учитывали по результатам копроовоскопических исследований методом Фюллеборна до и через 10 дней после назнвачения препарата. Расчет эффективности проводили по типу «контрольный тест» согласно «Руководству, одобренному Всемирной Ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии». Вермитокс в дозе 3,5 мкл/гол проявил 100%-ный эффект. При дозе 3,0 мкл/гол из 3 из 5 леченых животных освободились от мониезий. Количество яиц мониезий в фекалиях снизилось с 271,8±21,6 до 67,5±8,1 в 1 г, т.е. на 76%. При снижении дозы вермитокса до 3,0 мкл/гол. 4 из 5 леченых освободилось от цестод, а количество яиц сократилось с 260±22 до 23±4 в 1 г, т.е. на 92%. В контрольной группе, где применяли 1% раствор сульфата меди в дозе 20 мл/гол, из 5 леченых животных освободилось от мониезий 3; количество яиц в фекалиях снизилось на 75%. Количество яиц М. expansa и М. benedeni в 1г фекалий ягнят контрольной группы в период опыта оставалось примерно на одном уровне (284±23 и 298±29). Не отмечено побочного действия вермитокса на организм ягнят в период дегельминтизации и в течение 10 суток после нее. При вскрытии тонкого отдела кишечника 5 выборочно убитых ягнят из контрольной группы обнаружили в среднем по 1,8±0,2 экз. М. expansa и по 0,6±0,4 экз. М. benedeni. Анализ результатов показал, что вермитокс в дозе 3,5 мкл/гол является высокоэффективным цестодоцидом. Эффективность сульфата меди в дозе 20 мл/гол была сравнительно меньше.

5.4. Опыты по комиссионному испытанию вермитокса

Опыты по комиссионному испытанию вермитокса проводили на 35 ягнятах 5-ти мес. возраста, средней живой массой 20 кг, спонтанно инвазированных Moniezia expansa и М. benedeni. Ягнят разделили на 2 группы. Вермитокс давали 30 ягнятам в дозе 3,5 мкл/гол, внутрь, однократно, индивидуально, в виде суспензии утром. Ягнята второй группы (5 гол) препарат не получали и служили контролем. Эффективность вермитокса учитывали по результатам исследований фекалий методом флотации яиц до и через 10 дней после назначения препарата. При испытании препарата проводили наблюдения за клиническим состоянием дегельминтизированных ягнят. Ягнята хорошо пере-носили препарат. Не отмечено побочного действия вермитокса на организм ягнят, как в период дегельминтизации, так и в течение 10 сут после нее. Исходная экстенсивность инвазии ягнят составляла 100%; через 10 дней после дегельминтизации яйца М. expansa и М. benedeni в подопытной группе при копроскопии не были обнаружены. В контрольной группе, в среднем, 312±34 яиц/г фекалий. Вермитокс показала 100%-ную эффективность при мониезио-зах овец, при введении в дозе 3,5 мл на гол.

5.5. Коррекция иммунного статуса организма ягнят при мониезиозе с применением метилурацила и фена-сала

На комплексное применение антгельминтиков и иммуностимуляторов при гельминтозах указывают Э.Х. Даугалиева (1982, 1997, 2001 гг.), К.Г. Курочкина (1996, 1999) и др. В этой связи нами проведены исследования по отра-ботке схемы терапии мониезиозной инвазии ягнят с применением фенасала и иммуностимулятора (метилурацил). Данная работа проводилась в июле 2009 года на спонтанно инвазированных 24 ягнятах 10 мес. возраста. Животных разделили на 3 группы по принципу аналогов по 8 гол в каждой. Ягнятам 1 группы подкожно двукратно с интервалом 10 дней вводили метилурацил в дозах 1,5 и 2,5 мл/гол, животных 2 группы сначала дегельминтизировали фенасалом в дозе 65 мг/кг массы тела, однакратно в смеси с корбикормом в соотношении 1:10. Через неделю после назначения фенасала вводили подкожно, двукратно метилурацил в дозах 1,5 и 2,5 мл/гол с интервалом 12 дней. Ягнята 3-й группы (n =8) служили зараженным контролем, и препараты не получали. Исследования показали, что у ягнят первой группы после применения метилурацила на 20-е сутки количество яиц мониезий снизилось с 236,7 ± 26,3 экз. до 54,3 ± 7,1 экз./ г фекалий. Из 8 ягнят полностью освободились от цестоды 4 гол (ЭЭ=50 %). Этот факт обусловлен тем, что преимагинальные цестоды превращаются в половозрелые стадии. Применение метилурацила способствует полному освобождению организма ягнят от имагинальных мониезий. Однако, метилурацил не предохраняет от повторного заражения мониезиозом при пастбищном содержании на неблагополучных выпасах. Применение комплексной терапии способствовало освобождению ягнят от имагинальных мониезий на 100%. У животных контрольной группы, не получивших препараты, количество яиц г. фекалий на протяжении всего периода исследовании постепенно возрастало от 48 до 243 экз./г. фекалий. Результаты исследований показали, что комплексная терапия с применением фенасала и метилурацила в рекомендуемой схеме изгоняет из организма имагинальных мониезий и сохраняет антгельминтный эффект в течение 3 мес. В эти сроки репродуктивная способность имагинальных мониезий снижается 164 раза по сравнению с контрольными зараженными аналогами. В ходе данного эксперимента нами также изучена иммунобиологическая реактивность организма молодняка ягнят при комплексной терапии с применением фенасала и метилурацила. Полученные данные показали, что в количестве Е-РОК и ЕА-РОК между подопытными и контрольными животными отмечена существенная разница. Проведение дегельминтизации фенасалом усугубляет иммунобиологические сдвиги, вызывает снижение количества Т-лимфоцитов на 10-й день после обработки до 11,5%. После двухкратного назначения метилурацила в дозах 1,5 и 2,5 мл/гол относительное количество Т-лимфоцитов у ягнят постепенно повышалось до 39,3% (Р< 0,005). К 100-му дню количество Т-лимфоцитов в подопытных группах повысилось: в первой группе до 27,2±1,6%, во второй – до 48,6±4,2%, в третьей (контрольной) группе – до 23,4±1,0 %. У контрольных зараженных аналогов количество Т-лимфоцитов также в эти сроки снижалась от 21,6% до 9,8%. При определении количества активных Т-клеток отмечено их снижение на 30-й день опыта у ягнят первой группы до 9,6% с последующим повышением их количества на 130 день до 29%. У животных второй группы после применения терапии интенсивные ЕА-РОК составили на 10-й день 19,7% с тенденцией повышения к 130-му дню инвазии до 46,4%. У ягнят контрольной группы на 130 сут. исследований относительное количество ЕА-РОК находилось на уровне 9,2-10,8%. Применение комплексной терапии повышает иммунологические показатели организма ягнят, способствует снижению интенсивности инвазии в течение выпасного сезона. Взвешивание подопытных и контрольных животных показало, что введение фенасала и метилурацила положительно влияет и на привесы ягнят. К концу исследований (130-й день) ягнята 1 и 2-й подопытных групп превышали в живой массе зараженных сверстников, соответственно, на 6,4, 5,0 и 7,2 кг (таблица 17).
Таблица 17. Динамика живой массы, (кг)

Группа	Дни опыта
	10	30	70	100	130
1	13,2±0,2	14,1±0,7	18,1±0,5	23,8±1,0	26,4±0,8
2	13,6±0,4	14,8±0,6	20,7±0,3	25,4±0,8	27,8±0,5
3	11,5±0,3	13,8±0,6	17,2±0,8	19,5±0,3	21,4±0,6

<предыдущая страница | следующая страница>