На правах рукописи

АТАЕВ АНВАР МАХМУДОВИЧ

ЭКОЛОГО-ЭПИЗООТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МОНИЕЗИОЗА ОВЕЦ

В РЕГИОНЕ ЦЕНТРАЛЬНОГО КАВКАЗА И РАЗРАБОТКА

МЕТОДОВ ИММУНОКОРРЕГИРУЮЩЕЙ ТЕРАПИИ

03.02.11 – паразитология

АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

МАХАЧКАЛА – 2010

Работа выполнена на кафедрах микробиологии, гигиены и санитарии

ФГОУ ВПО «Кабардино-Балкарская государственная сельскохозяйственная академия им. В.М. Кокова»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Биттиров Анатолий Мурашевич

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, зав. лабораторией

паразитологии ГНУ РАСХН «Прикасийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» Магомедов Омаргаджи Ахмедгаджиевич

кандидат ветеринарных наук, доцент - Кадыжев Шамиль Магаруфович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Горский государственный

аграрный университет»

Защита состоится « 09 » декабря 2010 г. _11_часов на заседании диссертационного совета по защите док-торских и кандидатских диссертаций ДМ 220.026.02 при ФГОУ ВПО «Дагестанская государственная сельскохозяйст-венная академия» по адресу: 367032, Махачкала, ул. М.Гаджиева, 180.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Дагестанская государственная сельскохозяйственная академия»

Автореферат разослан «____» _________ 2010 г.

Ученый секретарь,

кандидат биологических наук, доцент М. М. Зубаирова

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. В нозологической структуре цестодозных инвазий овец в РФ, мониезиоз является од-ним из распространенных, и причиняет громадный экономический ущерб, складывающийся от падежа и снижения мясошерстной продуктивности. По данным В.М. Луговского (1999) убытки от падежа, недополучения шерсти и приплода от кишечных цестодозов только в Волгоградской области составляет 16,7 млн. руб. По данным Э.Х. Даугалиевой (2004), при мониезиозе ягнят прирост массы тела снижается на 1,8-3,0 кг, от них недополучают шерсти, в среднем, на 700 г, причем низкой тонины. Основным методом борьбы с мониезиозом овец остается дегельминтизация, которая проводится согласно существующей инструкции. Несмотря на то, что в инструкции в полном объеме предусмотрены меры борьбы с мониезиозом, данный нормативный документ зачастую не учитывает особенностей краевой эпизоотологии цестод в конкретных зонах и регионах России. Мало изученной строной мониезиоза также остается динамика эпизоотического процесса, закономерности распространения мониезиоза овец в Кабардино-Балкарской Республике (А.М. Биттиров, 2001). Ассортимент средств борьбы и профилактики мониезиоза овец располагает большим количеством препаратов. Цестодоцидностью в отношении Мoniezia expansa и Мoniezia benedeni у мелкого рогатого скота обладают сульфат меди (1% р-р), фенасал (йомезан) и его лекарствен-ные формы: (феналидон, полифен и др.), битионол, купроферр и 2,5%-ная суспензия альбендазола. Также широко при дегельминтизациях, особенно, при преимагинальных, используются бензимидазольные средства – фенал, пана-кур, сипкур, вальбазен и др. Однако, несмотря на высокую эффективность, отмеченные препараты имеют высокую стоимость, а фенасал уже давно не производится в России. Установлено, что влияние гельминтов и средств дегельминтизации на макроорганизм сопровождается иммуносупрессией (Э.Х. Даугалиева, 1985, 1993, 1994, 1998, 2003). По данным Э.Х. Даугалиевой (1994), К.Г. Курочкиной (1996), М.Ш. Акбаева (1998) мониезиоз ягнят протекает с явлениями эритропении, гипогемоглобинемии и лейкоцитоза.При этом, также повышаются содержание гаммаглобулинов и уменьшается количество альбуминов, свободных аминокислот в сыворотке крови. Поэтому, решение проблемы терапии мониезиоза овец может быть основано на основе использования иммуномодуляторов последнего поколения в комплексе с антгельминтиками, что позволит не только изгнать мониезий, но и повысить иммунобиологическую реактивность организма, а также снизить патогенное воздействие паразита на организм овец (Р.В. Петров, 2000). С учетом этого, в настоящем приоритет отдается разработке и испытанию новых комплексных, эффективных и недорогих препаратов (Э.Х. Даугалиева, 2002). В их числе заслуживают внимание два новых препарата-феррофен и вермитокс, которые представлены на изучение их иммунотропной и терапевтической эффективности при мониезиозе овец. Учитывая своеобразие природно-климатических условий Кабардино-Балкарии, недостаточную изученность распространения мониезиоза, считаем целесообразным, уточнить распространение инвазии и разработать комплексную терапию.

Цель и задачи исследований. Целью исследования является изучение особенностей экологии и эпизоотологии, распространения мониезиоза овец в Кабардино-Балкарской Республике, уточнение видового и возрастного состава Moniezia expansa и Moniezia benedeni у мелкого рогатого скота, определение срока дегельминтизации животных, терапевтической эффективности новых лекарственных форм препаратов - феррофен и вермитокс, разработка схемы лечения животных и определение иммунотропных свойств препаратов.

В соответствии с целью предстояло решить следующие задачи:

- изучить эколого-видовой состав и распространение возбудителей

мониезиоза в Кабардино-Балкарской Республике;

- определить экстенсэффективность препаратов феррофен и вермитокс;

- изучить иммунотропные свойства феррофена и вермитокса;

- разработать сроки дегельминтизации овец в регионе.

Научная новизна. В Кабардино-Балкарской Республике изучены эпизоотические особенности распространения, видовой состав возбудителей мониезиоза. Изучена терапевтическая эффективность феррофена и вермитокса. Проведена титрация доз, установлена терапевтическая доза, эффективность препаратов изучена в эксперименте и производственных условиях. Впервые определены иммунотропные свойства феррофена и вермитокса.

Практическая значимость. Для внедрения в ветеринарную практику всесторонне изучены терапевтическая эф-фективность феррафена и вермитокса, определена терапевтическая доза и изучены иммунотропные свойства препаратов. Продолжены исследования по применению иммуностимуляторов в комплексе с антгельминтиками, способствующие быстрому восстановлению иммунного статуса ягнят, вызываемых гельминтами и антгельминтиками. Данные по-эпизоотологическому мониторингу мониезиоза овец, иммунотропным свойствам препаратов и их терапевтической эффективности вошли в «Комплексную программу по борьбе с мониезиозом овец в Кабардино-Балкарской Республике», которые утверждены Министерством сельского хозяйства КБР (2007). Результаты изучения иммунного статуса ягнят; испытания иммуномодуляторов и антгельминтиков использовано при разработке «Рекомендаций по применению феррофена и вермитокса при терапии мониезиозной инвазии овец» (2008), которые утверждены РГУ «Управление ветеринарии Кабардино-Балкарской Республики» (протокол №8/1 от 20 августа 2008 г.). Данные о биоэкологии М. expansa и М. benedeni, о формировании биотопов инвазии используются в учебном процессе на факультете ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Кабардино-Балкарская государственная сельскохозяйственная академия имени В.М. Кокова».

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- эколого-эпизоотический мониторинг мониезиоза овец в Кабардино-Балкарской Республике;

- эколого-видовой состав возбудителей М. expansa и М. benedeni;

- терапевтическая эффективность феррофена и вермитокса;

- иммунотропные свойства феррофена и вермитокса; комплексная терапия при мониезиозе.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы прошли апробацию на Международной научн-практ. конф. ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет» (г. Саратов, 2006); Всероссийской научно-практической конференции ГНУ «Всероссийский НИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина» (г. Москва, 2007); Междуна-родной научной конференции ФГОУ ВПО «Московский государственный университет прикладной биотехнологии» (г. Москва, 2008); Международной научн.-практ. конф. ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный универси-тет» (г. Краснодар, 2008).

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 10 научных статей (3 в рекомендованных ВАК РФ изданиях).

Личный вклад автора в работы, выполненные в соавторстве и включённые в диссертацию, состоит в формиро-вании направления, постановке общей задачи, личном участии во всех этапах работы: в ходе экспериментального исследования, в анализе и интерпретации полученных данных. В совместных публикациях вклад автора составил 80%. Соавторы не возражают в использовании результатов совместных исследований А.М. Атаевым (справки представлены в совет по защите диссертаций). Работа выполнялась под научным руководством доктора биологических наук, профессора А.М. Биттирова, который оказывал научно-методическую помощь в проведении исследований.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, 5 глав собственных исследований, заключения, выводов и практических предложений, списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 36 таблицами. Список литературы включает 227 источников, из них 139 отечественных и 88 иностранных авторов. Приложение изложена на 7 страницах.
1. В обзоре литературы подвергается анализу 227 работ отечественных и иностранных авторов по вопросам формирования эпизоотического процесса и химио – и иммунотерапии при мониезиозе овец; о количественных показателях зараженности молодняка овец мониезиями в аграрных экосистемах; экологической безопасности и эффективности антгельминтиков при мониезиозе овец.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа по изучению биоэкологии и эпизоотических особенностей мониезиоза овец выполнена в 2004 -2009 гг. в Кабардино-Балкарской Республике. Эксперименты проведены на кафедре микробиологии, гигиены и санитарии ФГОУ ВПО «Кабардино-Балкарская государственная сельскохозяйственная академия» и в хозяйствах республики. Всего под опытами находилось 1730 голов овец и 100 мышей линии BALB/C. Эпизоотологические особенности рас-пространения мониезиоза овец изучали в 5 районах на ягнятах от 2-х до 6 мес. возраста, ярках и валухах в течение 2-х лет. В опытах по терапии использовали 422 ягнят. Зараженность ягнят определяли по результатам копроовоскопических исследований методом флотации (метод Фюллеборна) проб фекалий, а терапевтическую эффективность феррафена и вермитокса по «контрольному тесту». В терапевтических опытах животных исследовали дважды, до и на 10-15 дни после назначения препарата. Для иммунологических исследований использовали гепаринизированную кровь и сыворотку. Иммунотропность препаратов феррофен и вермитокс определяли по их влиянию на увеличение количества антителообразующих клеток (АОК) в селезенке по методу Canningham (1965) и по индукции гиперчувствительности замедленного типа по методу Манько В.М. и др. (1989). Определение аутологичных розеткообразующих клеток (ауто-РОК) мышей проводили, используя технику реакции, аналогичную выявлению спонтанных розеткообразующих лимфоцитов (Е-РОК) по Jondal et al. (1984), описанной в «Методических рекомендациях по изучению влияния антгельминтиков на иммунный статус животных при гельминтозах» Э.Х. Даугалиева и др. (1989). В качестве эритроцитарного маркера применяли 1,5%-ную суспензию аутологичных эритроцитов. В-лимфоциты мышей идентифицировали по наличию рецептора для третьего компонента комплемента (Сз) на поверхности клеточной мембраны по методкам Mendes et al. (1973), Даугалиевой (1989). В качестве эритроцитарного маркера использовали гетерологические эритроциты быка, сенсибилизиро-ванные мышиным компонентом. Определяли абсолютное и относительное количество лимфоцитов. О неспецифической резистентности организма животных судили, изучая гетерофильные агглютинины в сыворотке крови, определяемые в реакции Пауля-Буннеля, в модификации Э.Х. Даугалиевой (1989). Материалы исследования обрабатывали статистически по методу Стьюдента. Критерий существенности расхождения двух показателей (контроль, опыт) определяли по формуле: Mon - MkТ = Mon2 + Mk2. Оценку Т-системы проводили по таблице распределения Стьюдента для малых выборок при уровне значимости 0,05 (В.Ю. Урбах, 1963).
3. ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МОНИЕЗИОЗА ОВЕЦ

В КАБАРДИНО-БАЛКАРСКОЙ РЕСПУБЛИКЕ

3.1. Климатические условия и методы овцеводства

В разделе дана физико-географическая оценка 10 районов Кабардино-Балкарской Республики и их отличия от других регионов Северного Кавказа, характеристика природных компонентов 3-х природно-климатических поясов и технологий овцеводства в районах республики, а также дается краткая характеристика флоры и фауны равнинного, предгорного и горного пояса.

3.2. Краевая эпизоотология мониезиоза овец

Краевую эпизоотологию мониезиоза овец в Кабардино-Балкарии изучили в районах традиционного овцеводства. Установлена различная экстенс-и интенсинвазированность, которые колебались и были неодинаковыми в зависимости от расположения хозяйств по зонам, времени года исследования и типа исследованных пастбищ. В результате гельминтокопрологических исследований 1080 гол овец из 10 районов выявили 505 гол (46,8%) животных инвазированных мониезиями двух видов (М. expansa и М. benedeni). Мониезиоз имеет распространение во всех обследованных районах. Процент зараженности мониезиями колеблется от 8 до 100% и зависит от возраста животных и сезона года. В Кабардино-Балкарской Республике процент инвазии мониезиоза у молодняка текущего года рождения составил (40 100%). Наибольшую экстенсивность инвазии (100%) наблюдали у ягнят в Лескенском районе. Это связано еще и с тем, что в Республике за последние годы выпало большое количество осадков, а дегельминтизацию в хозяйствах проводили однократно в мае. У обследованных в июне ягнят в возрасте 4-6 мес. экстенсивность инвазии составила 57,8%, молодняка до 1 года - 41,2%, а у взрослых овцематок - процент инвазии составил 33,3%. В среднем критерий ЭИ мониезиоза овец обнаруживался на уровне 42,8%. Причем, у взрослой популяции овец в июне этиофактором мониезиоза является возбудитель М. benedeni. При копроовоскопии проб фекалий установлено, что экстенсивность мониезиозной инвазии ягнят, обследованных в августе, составила в среднем 63,6%, у молодняка овец до 1 года – 56,0%, взрослых овцематок – 17,0%. В среднем ЭИ мониезиоза овец всех возрастов в Кабардино-Балкарской Республике составила 54,7%. Высокий процент инвазии в августе связан с обильным выпадением осадков, и с игнорированием сроков имагинальных дегельминтизаций. В сентябре ЭИ мониезиоза ягнят составила в среднем 47,6%, у молодняка овец до 1года - 50,0%, взрослых овцематок - 25,0%. В среднем ЭИ мониезиоза овец всех возрастов в Республике составила 45,9%. В октябре мониезиоз ягнят регистрировали с ЭИ в среднем 56,3%, молодняка овец до 1года - 50,0%, взрослых овцематок - 28,5%. В среднем ЭИ мониезиоза овец всех возрастов в Республике составила 48,6%. Доминирующим видом возбудителя мониезиоза овец в регионе в летний период является М. expansa, а в осенний период (сентябрь-октябрь) вид М. benedeni. В структуре смешанной инвазий мониезий количественно преобладал вид М. expansa. В Кабардино-Балкарской Республике наблюдается сложная эпизоотическая ситуация по мониезиозу овец, где охвачено инвазией в среднем до 60,0% ягнят, до 50,0% молодняка до 1года и - 25,0% взрослых овцематок, что требует усовершенствования мер наступательной профилактики в хозяйствах всех форм собственности. Экстенсивность и интенсивность инвазии мониезиоза овец резко отличались в хозяйствах, практикующих кошарно-пастбищное, стационарно-пастбищное и отгонно-пастбищное содержание овец. Здесь определяющим фактором распространения аноплоцефалятозной инвазии овец всех возрастных групп в едином ареале обитания является продолжительность трофического контакта с биотопами инвазии с высокой концентрацией орибатидных клещей, зараженных цистицеркоидами М. expansa и М. benedeni. При кошарно-пастбищном содержании среднегодовые показатели ЭИ мониезиоза овец были сравнительно меньше (25,0%), чем при стационарно-пастбищном (45,6%) и отгонно-пастбищном содержании (54,5%). Сравнивая инвазированность овец разных возрастных групп, с учетом формы содержания можно сказать, что экстенсивность инвазии была больше у ягнят текущего года рождения. Так, при кошарно-пастбищном содержании ягнят ЭИ составляла 33,2% с интенсивностью М. expansa 2,3 экз. и М. benedeni 1,5 экз./гол; при стационарно-пастбищном содержании – ЭИ = 58,0% с интенсивностью М. expansa 2,7 экз. и М. benedeni 1,8 экз./гол; при отгонно-пастбищном содержании – ЭИ = 70,7% с интенсивностью М. expansa 3,1 экз. и М. benedeni 2,2 экз./гол. Экстенсивность и интенсивность инвазии мониезиоза ягнят также находится в прямой и косвенной зависимости от времени проведения окотной компании. Так, высокие ЭИ и ИИ наблюдали у ягнят зимнего и весеннего окота, убитых в августе - сентябре. Экстенсивность инвазии мониезиоза ягнят весеннего окота колебалась в пределах 17,0-64,0%, интенсивность 1-1,5 экз. ЭИ М. expansa составила 45,4%, ИИ – 1,2 экз., М. benedeni, соответственно, 36,3% и 1,25 экз. У ягнят зимнего окота ЭИ М. expansa составила 36%, ИИ – 1,5 экз., М. benedeni ЭИ – 36% при ИИ – 1,2 экз. У ягнят зимнего окота осенью чаще выявили М. benedeni. ЭИ составила 17,0%, ИИ – 1 экз. В приусадебных хозяйствах, использующих под выпасы ягнят зимнего и весеннего окота пойменные территории равнинной зоны, ЭИ и ИИ колебались в пределах 25,0-58,0% и 1-2,3 экз./гол. Инвазию высокой степени у ягнят зимнего окота, выгнанных на неблагополучные пастбища в конце апреля или начале мая, регистрировали в июне и июле. К концу сентября мониезиоз, вызванный М. expansa, резко снижался. У молодняка старше 7 мес. и у взрослых животных чаще обнаруживали М. benedeni. В регионе эпизоотической особенностью мониезиоза является экологическая устойчивость паразитарных систем цестод М. expansa и М. benedeni. Об этом свидетельствует результаты вскрытия, при которых регистрировались высокие значения ЭИ и ИИ у ягнят зимнего и весеннего окота даже в ноябре. При исследовании состава возбудителей установлено, что экстенсивность и интенсивность М. expansa по сравнению с М. benedeni была выше. В фермерских хозяйствах у ягнят ЭИ мониезиоза ягнят колебалась в пределах 33,3-47,3%, при ИИ 2,3 экз./гол; молодняка в возрасте до 1 года 29,7-41,6% и 2,0 экз.; взрослых овец 25-33,3% и 1,0-1,5 экз. В кол-лективных хозяйствах ЭИ мониезиоза ягнят не превышала уровень 21,05-28,6% при ИИ – 1,5 экз.; молодняка – 11,76-16,6% при ИИ – 1,0 экз./гол.
3.3. Экологический анализ М. expansa и М. benedeni у овец на разных типах пастбищ

Особенности распространения мониезиоза в Кабардино-Балкарской Республике изучены путем гельминтологического вскрытия тонкого кишечника 854 овец в течение 6 лет исследований. Цестод идентифицировали и подсчитывали отдельно по видам. Результаты исследований отражены в таблице 1. Как видно, по данным вскрытия тонкого кишечника у 174 гол. обнаружено М. expansa и М. benedeni. В среднем, ЭИ составила 20,4%, при интенсивности инвазии М. expansa 1,980,18 экз./гол, М. benedeni – 1,270,13 экз./гол. В экосистеме Кабардино-Балкарской Республики у овец круглогодичного пастбищного содержания показатели ЭИ и ИИ мониезиоза были различными, что зависит степени биологической активности паразитарных систем М. expansa и М. benedeni на уровне промежуточного хозяина и биотических и абиотических факторов. В равнинном поясе, где характерно недостаточное увлажнение и относительная влажность 50%, средняя температура воздуха в июле составляет 29С, а средний максимум доходит до 40С, осенью заморозки наступают в начале октября, а в декабре среднемесячная температура падает до –3,5 (средний абсолютный минимум равен –22С) показатели ЭИ и ИИ мониезиоза овец были минимальными и составили, соответственно, 7,7% и М. expansa – 1,50,17, М. benedeni – 1,00,12 экз./гол. В экосистеме засушливых выпасов Кабардино-Балкарии у овец, в среднем, ЭИ мониезиоза овец составил 13,5% и ИИ - М. expansa – 1,70,16, ИИ - М. benedeni – 1,20,10 экз./гол.

Таблица 1. Показатели ЭИ и ИИ М. expansa и М. benedeni в экосистеме Кабардино-Балкарской Республики

Экосистемы	Исследовано, гол.	Инвазировано, гол.	ЭИ, %	ИИ М. expansa, экз./гол	ИИ М. benedeni, экз./гол
Засушливые выпасы	170	23	13,5	1,70,16	1,20,10
Увлажненные пастбища	187	59	31,6	2,70,21	1,80,15
Лесокустарниковые угодья	175	46	26,3	2,20,18	1,10,11
Культурные пастбища	167	34	20,3	1,80,18	1,30,12
Итого:	854	174	-	-	-
В среднем:	-	-	20,4	1,980,18	1,270,13

При круглогодичной пастьбе отар овец на увлажненных пастбищах показатели ЭИ и ИИ мониезиоза были сравнительно больше и составляли, соответственно, 31,6% и М. expansa – 2,70,21, М. benedeni – 1,80,15 экз./гол. В лесокустарниковых и культурных угодьях критерии ЭИ и ИИ мониезиоза были сравнительно больше, чем на засушливых выпасах и варьровали в пределах, соответственно, 26,3-20,3% и М. expansa – 2,20,18- 1,80,18, М. benedeni – 1,10,11-1,30,12 экз./гол. При изучении помесячной восприимчивости молодняка овец мониезиозу установлено, что при пастьбе на увлажненных пастбищах в 2005-2008 гг. зараженность возрасла в начале лета от 27,4 до 31,8%, в конце лета – от 35,5 до 39,0%, а в середине осени снизилось от 38,1 до 29,2%. Экстенсинвазированность ягнят мониезиозом возрасла в течение 4-х лет с 38,0 до 69, 4% (более 2 раз), что связано с активным биотопоформированием орибатидных клещей на не вспаханных присельских земельных массивах (таблица 2).

Таблица 2. Динамика восприимчивости молодняка овец мониезиозу на увлажненных пастбищах (по данным ПГВ тонкого кишечника)

Год	Исследовано, гол.	Соотношения инвазированных овец по месяцам
		Инвазировано	ЭИ	Июнь		Август		Октябрь
		гол.	%	гол.	%	гол.	%	гол.	%
2005	128	49	38,0	13	27,4	17	35,5	19	38,1
2006	172	93	54,2	27	29,1	34	36,2	32	34,7
2007	208	126	60,4	40	31,6	47	37,0	39	31,4
2008	241	167	69,4	53	31,8	66	39,0	48	29,2

На увлажненных пастбищах овцы инвазированы одновременно М. expansa и М. benedeni. Следует отметить, что зимой и весной в тонком кишечнике ягнят все возрастные популяции М. expansa и М. benedeni (100%) достигают половозрелой стадии, в другие сезоны обнаруживаются, как имагинальные, так и преимагинальные формы, что также необходимо использовать при разработке методов терапии и профилактики инвазии.

3.4. Эпизоотическая характеристика пастбищных биотопов кишечных цестод М. expansa и М. benedeni с учетом вертикальной поясности

3.4.1. Эпизоотическая характеристика пастбищных биотопов цестод М. expansa и М. benedeni в рав-нинном поясе

Для определения напряженности эпизоотической ситуации по мониезиозу в равнинном поясе Кабардино-Балкарской Республики было исследовано по 30 га пастбищ в каждом районе. Поэтапно были определены площади, % неблагополучных очагов инвазии, среднее количество яиц М. expansa и М. benedeni в 1 г почвы биотопа, плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа, зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами мониезий обоих видов. На выпасах равнинного пояса было подвергнуто копроовоскопии по 150 проб почвы различных типов пастбищ Прохладненского, Майского и Терского районов. По результатам овоскопии почв пастбищ равнинного пояса установлено количество биотопов М. expansa и М. benedeni, а также высокую плотность и зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами мониезий обоих видов.

В Прохладненском районе отмечали наименьшее количество биотопов и относительно низкую плотность очагов инвазии М. expansa и М. benedeni. При исследовании 30 га пастбищ Прохладненского района выявлено 420 биотопов, площадь неблагополучных биотопов составила 11,4 га (38,0%) при средней площади 1 ед. биотопа 714,3 м2. В 1 г почвы было обнаружено, в среднем, 27,4 экз. яиц М. expansa и 20,9 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа составила 148,413,6 экз., зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 9,20,8%, М. benedeni – 6,40,5%.

В Майском районе количество, плотность и площади неблагополучных биотопов были сравнительно больше на круглогодично используемых пастбищах (табл. 3). На 30 га выпасов Майского района установлено наличие 572 единиц биотопов с площадью 16,8 га (56,0%) при средней площади 1 ед. биотопа 525,0 м2, обнаружено, в среднем, 33,8 экз. яиц М. expansa и 27,3 экз. М. benedeni в 1 г почвы. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Майского района была больше и составила 185,2 экз., зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 12,3%, М. benedeni – 8,0%.

На 30 га пастбищ Терского района было выявлено 644 единиц биотопов мониезиоза ягнят. Площадь неблагополучных биотопов составила 19,6 га (65,3%) при средней площади 1 ед. биотопа 465,8 м2. В 1 г почвы обнаружено, в среднем, 37,2 экз. яиц М. expansa и 30,4 экз. М. benedeni. На пастбищах Терского района плотность орибатид в 1 м2 биотопа составила 220,7 экз., а их зараженность цистицеркоидами М. expansa 16,5%, М. benedeni – 11,3%.

При дифферинцированной овоскопии почвы разных типов пастбищ в равнинном поясе были установлены различия в уровене их загрязненности яйцами М. expansa и М. benedeni, что означает их разное участие в формиро-вании и развитии эпизоотического процесса инвазии. При овоскопии 300 проб почвы 3 типов пастбищных угодий наиболее загрязненными инвазионными элементами цестод М. expansa и М. benedeni оказались долинно-заречные выпасы (69,0% загрязненных проб почвы), затем кустарнико-разнотравные пастбища (58,0%) и разнотравно-луговые пастбища (42,0% загрязненных проб почвы). Среднее количество яиц М. expansa и М. benedeni в 1г почвы долинно-заречных пастбищ составило, соответственно, 42,35,2 и 33,74,6 экз. в 1 г почвы, разнотравно-луговых пастбищ – 20,93,1 и 18,62,7 экз., кустарниково-разнотравных пастбищ – 35,24,0 и 26,33,5 экз. в 1 г почвы. Эти данные пока-зывают на высокий уровень контаминации пастбищной среды инвазионными элементами М. expansa и М. benedeni в равнинном поясе, что следует учитывать при прогнозировании эпизоотической ситуации по мониезиозу овец и при организации пастбищного содержания овцепоголовья.
3.4.2. Эпизоотическая характеристика пастбищных биотопов кишечных цестод в предгорном поясе

Плотность и площади неблагополучных биотопов М. expansa и М. benedeni были наибольшими в предгорьях Черекского, Баксанского, Лескенского, Урванского, Чегемского и Зольского района, подвергаемых круглогодичной эксплуатации (280-300 дней). При овоскопии проб почвы с 20 га пастбищ Урванского района выявлено 613 единиц совмещенных биотопов цестод обоих видов с площадью 14 га (70,0%) при средней площади 1 ед. биотопа 326,3 м2. В 1г почвы обнаружено 36,24,0 экз. яиц М. expansa и 25,63,7 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Урванского района была больше и составила 219,316,2 экз., зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 18,61,3%, М. benedeni – 10,70,8%. В Лескенском районе установлено наличие 742 единиц биотопов с площадью 16,0 га (80,0%) при площади 1 ед. биотопа 269,5 м2. В 1г почвы обнаружено, в среднем, 41,54,7 экз. яиц М. expansa и 30,43,9 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 а выпасов Лескенского района составила 247,420,8 экз., зараженность их цистицеркоидами М. expansa 21,41,6%, М. benedeni – 13,61,1%. При обследовании пастбищ Чегемского района выявлено наличие 530 биотопов мониезиозной инвазии с площадью 11,0 га (55,0%) при средней площади 1 ед. биотопа 377,4 м2. В 1г почвы обнаружено, в среднем, 28,93,7 экз. яиц М. expansa и 20,33,1 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Чегемского района составила 193,514,6 экз., зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 14,91,1%, М. benedeni – 8,80,6%. На предгорных выпасах Черекского района выявили сравнительно высокую плотность очагов мониезиозной инвазии. При исследовании 20 га пастбищ выявлено 695 биотопов, площадь неблагополучных микроочагов составила 17 га (85,0%) при средней площади 1 ед. биотопа 287,8 м2. В 1г почвы обнаружено, в среднем, 46,25,1 экз. яиц М. expansa и 34,44,2 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Черекского района была больше и составила 266,222,3 экз., зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 27,52,2%, М. benedeni – 17,61,4%. На пастбищах предгорного пояса Баксанского района установили наибольшие показатели плотности очагов М. expansa и М. benedeni с наличием на 20 га выпасов 740 единиц биотопов с общей площадью 18 га (90,0%) при площади 1 ед. биотопа 270,3 м2. В 1г почвы обнаружено, в среднем, 52,45,6 и 41,24,5 экз. яиц кишечных цестод обоих видов. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Баксанского района была больше и составила 294,427,6 экз., зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 31,22,8%, М. benedeni – 20,51,7%. При анализе результатов овоскопии почвы пастбищ предгорного пояса установлено активное формирование пастбищных очагов М. expansa и М. benedeni с охватом 55,0-90,0% предгорных территорий, находящихся в пастбищном обороте, с которыми поголовье овец находится в круглогодичном пищевом контакте. В предгорном поясе были систематизированы по расположению и ботаническому составу 5 типов технологически используемых пастбищ, где эпизоотический процесс мониезиозной инвазии овец проявляется с разными значениями экстенсивности инвазии (табл. 3).

При овоскопии 500 проб почвы 5 типов пастбищных угодий наиболее загрязненными инвазионными элементами М. expansa и М. benedeni оказались переувлажненные луговые пастбища (96,0% загрязненных проб почвы), затем - умеренно увлажненные луговые пастбища (78,0%), лесокустарниковые выпасы (64,0%), долинные (50,0%), склоновые пастбища (29,0% загрязненных проб почвы) при разных значениях яиц кишечных цестод (таблица 3).

Таблица 3. Степень загрязненности различных типов пастбищ яйцами М. expansa и М. benedeni в предгорном поясе (по данным овоскопии проб почвы)

Тип пастбища	Исследовано проб почвы	Кол-во проб с яйцами М. expansa и М.benedeni	% загрязненных проб почвы	Среднее кол-во яиц М. expansa в 1г почвы, экз.	Среднее кол-во яиц М. benedeni в 1г почвы, экз.
Переувлажненные луговые	100	96	96,0	52,35,6	41,04,3
Умеренно увлажненные луговые	100	78	78,0	46,05,1	34,24,0

В 1 г почвы переувлажненных луговых пастбищ обнаруживается 52,35,6 экз. яиц М. expansa и 41,04,3 экз. М. benedeni; умеренно увлажненных луговых пастбищ, соответственно, 46,05,1 и 34,24,0 экз.; лесокустарниковых выпасов – 41,44,7 и 30,43,8 экз.; склоновых – 23,63,0 и 18,12,5 экз.; долинных пастбищ – 28,13,7 и 20,03,0 экз. В предгорном поясе средняя загрязненность почв яйцами цестод обоих видов составила 63,4% при обнаружении в 1 г почвы 38,34,4 экз. яиц М. expansa и 28,73,3 экз. М. benedeni (таблица 3). Как видно, в теплый период года в предгорном поясе пастбища сильно загрязнены яйцами цестод, что позволяет прогнозировать сложную эпизоотическую ситуацию по мониезиозу овец.

3.4.3. Эпизоотическая характеристика пастбищных биотопов мониезиоза в горном поясе

Биотопы мониезиозной инвазии ягнят в горном поясе формируются на высоте до 2800 м. н. у. моря на отгонно-горных выпасах Черекского, Чегемского и Эльбрусского районов. С целью изучения загрязненности пастбищ рай-онов яйцами М. expansa и М. benedeni в горном поясе было исследовано по 30 проб почвы. Для определения уровня контаминации пастбищных угодий было подвергнуто овоскопии проб почвы с 20 га выпасов низкогорного пояса (высота 1000-1500 м), среднегорного пояса (высота 1600-2000 м), высокогорного пояса (высота 2100-3000 м). На 20 га пастбищ горного пояса Черекского района определили 246 единиц биотопов с общей площадью 5,8 га (29,0%) при площади 1 ед. биотопа 813,0 м2. В 1г почвы обнаружено, в среднем, 24,72,9 экз. яиц М. expansa и 19,32,4 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Черекского района составила 96,28,6 экз. при зараженности их цистицеркоидами М. expansa 10,30,9%, М. benedeni – 6,20,5%. На выпасах Чегемского района регистрировали 213 биотопов с площадью неблагополучных очагов 4,2га (21,0%) при площади 1 ед. биотопа 939,0 м2. В 1г почвы обнаружено, соответственно, 18,32,6 и 14,82,1 экз. яиц М. expansa и М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Чегемского района составила 73,56,9 экз. при зараженности орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa 7,20,6%, М. benedeni – 4,40,3%. Пастбища Эльбрусского района сравнительно в меньшей степени загрязнены инвазионными элементами кишечных цестод. На 20 га выпасов выявлено 168 единиц биотопов с площадью 3,1 га (15,5%) при площади 1 ед. биотопа 1190,5 м2. В 1г почвы обнаружено, в среднем, 13,202,1 экз. яиц М. expansa и 9,501,8 экз. М. benedeni. Плотность орибатидных клещей в 1 м2 биотопа на выпасах Эльбрусского района составила 54,004,7 экз. при их зараженности цистицеркоидами М. expansa 5,00,4%, М. benedeni – 2,700,2%. Как видно, по результатам эколого-эпизоотологических исследований пастбищ горного пояса установлено их относительно низкий уровень контаминации яйцами М. expansa и М. benedeni, особенно, в высокогорном поясе. При этом также было установлено, что в низкогорных пастбищах уровень загрязненности почвы яйцами М. expansa и М. benedeni составил 53,0%, среднегорных – 34,0%, высокогорных – 11,0%. В почвах нивального пояса яиц цестод не обнаружено. Среднее количество яиц М. expansa в 1г почвы в низкогорном поясе составило 28,73,1 экз., М. benedeni – 22,42,7 экз., в среднегорном, соответственно, 17,32,5 и 13,82,0 экз., в высокогорном поясе – 10,22,0 и 7,41,6 экз. В среднем уровень загрязненности почвы горных пастбищ яйцами составил 23,0% при обнаружении в 1г почвы 18,72,5 экз. яиц М. expansa и 14,52,1 экз. М. benedeni. Исследования в горном поясе, показали на низкий уровень контаминации пастбищ инвазионными элементами кишечных цестод с увеличением высоты над уровнем моря.

3.5. Экологическая характеристика мониезиоза овец на уровне паразитарного звена «внешняя среда – яйцо – цистицеркоид – внешняя среда»
3.5.1. Выживаемость яиц М. expansa и М. benedeni во внешней среде

Изучение сроков развития яиц М. expansa и М. benedeni в естественных условиях республики проводили на специально отведенном и отгороженном опытном участке, расположенном на территории хозяйства. Для определения жизнеспособности ежедекадно, начиная с 10-го дня после закладки опытов, брали пробы фекалий и почвы с яйцами. В каждом случае исследовали под микроскопом по 70 экз. яиц М. expansa и М. benedeni. Возможность перезимовывания яиц М. expansa и М. benedeni изучали следующим образом. В конце ноября яйца мониезий ставили на поверхность почвы (в смеси с фекалиями ягнят) и на глубину почвы 10-15 см. По истечении зимнего периода яйца из фекалий и почвы исследовали овоскопическими методами. Исследования показали, что в сохранении жизнеспособности яиц М. expansa и М. benedeni знчительную роль играет температура внешней среды. Так, в марте при средней температуре воздуха 10,7ºС количество жизнеспособных яиц М. expansa и М. benedeni составило, соответственно, 22,4 и 18,6%; в апреле (18,6ºС) – 26,2 и 21,0%; в мае (21,2ºС) – 29,5 и 23,8%; в июне (24,8ºС) – 33,0 и 26,4%; в июле (26,3ºС) – 28,7 и 24,3%; в августе (24,9ºС) – 36,9 и 28,4%; в сентябре (20,6ºС) – 40,3 и 32,0%; в октябре (16,0ºС) – 34,8 и 27,4%; в ноябре (10,2ºС) – 31,5 и 24,8%; в декабре (4,6ºС) – 29,6 и 21,3%. Во внешней среде в течение года сохраняется до 22,4-40,3% яиц М. expansa и 18,6-32,0% яиц М. benedeni. Изучение возможности перезимовывания яиц М. expansa и М. benedeni показало на то, что зрелые яйца цестод, находящиеся с 30 ноября по 10 марта на поверхности почвы оказались погибшими. Зрелые яйца мониезий, находящиеся в течение указанного срока в фекалиях ягнят также оказались не жизеспособными. На глубине почвы 5-20 см сохраняли жизнеспособность 22,4% зрелых яиц М. expansa и 18,8% М. benedeni. Не зрелые яйца цестод оказались более устойчивыми к воздействию низких и чередующих температур. В фекалиях ягнят сохраняли жизеспособность 29,6% не зрелых яиц М. expansa и 26,4% не зрелых яиц М. benedeni. На глубине почвы 15-20 см критерии жизеспособности не зрелых яиц цестод были больше и составляли, соответственно, 40,6 и 37,8%. Такое количество жизнеспособных зрелых и не зрелых яиц способно индуцировать раннее весеннее заражение орибатидных клещей и активизировать эпизоотический процесс мониезиоза ягнят с двух вершинным пиком инвазии летом и осенью.

3.5.2. Динамика зараженности орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa и М. benedeni

Исследования проводили в равнинном поясе в неблагополучном по мониезиозу пойменном пастбище. В таблице 4 приведены данные динамики зараженности орибатидных клещей (без видовой дифферинциации) цистицеркоидами мониезий обоих видов.

Таблица 4. Плотность орибатидных клещей и динамика их инвазированности цистицеркоидами М. expansa и М. benedeni (без видовой дифферинциации)

Месяц	Плотность орибатидных клещей на 1 м2	Кол-во орибатидных клещей	Количество инвазированных орибатидных клещей	% инвазированности
Март	127	250	22	8,6
Апрель	188	268	26	9,8
Май	216	220	27	12,4
Июнь	255	260	39	14,9
Июль	293	240	38	16,1
Август	328	258	53	20,4
Сентябрь	284	253	49	19,2
Октябрь	156	282	44	15,6
Ноябрь	98	263	31	11,8

Как видно, плотность орибатидных клещей в теплый период варьировал в пределах 216-328 экз./м2 биотопа. Максимальную зараженность орибатидных клещей цистицеркоидами М. expansa и М. benedeni регистрировали в августе-сентябре (19,2-20,4%).

4. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОТРОПНЫХ И АНТГЕЛЬМИНТНЫХ СВОЙСТВ КОМПЛЕКСНЫХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ МОНИЕЗИОЗЕ ОВЕЦ
4.1. Иммунотропные свойства препарата феррофен

Имунотропную активность феррофена изучали в соответствии с «Методическими рекомендациями по экспери-ментальному изучению иммунотропной активности фармакологических препаратов», одобренными Фармкомитетом МЗ России (1998 г.). По выраженности реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) и розеткообразующих клеток (ауто-РОК) судили о влиянии феррофена на клеточное звено иммунитета.

Реакция гиперчувствительности замедленного типа. В результате установлено, что индекс стимуляции (ИС) у опытных мышей линии BALB/C был на уровне 10,6±0,2, а в контроле 2,4, что данные свидетельствуют о повышении функциональной активности Т лимфоцитов (табл. 5).
Таблица 5. Реакции гиперчувствительности замедленного типа

№ группы	Доза феррофена	Кратность	ИС
1	0,03 мл/гол	3	10,6±0,2
2	контроль	-	2,4

Как видно, феррофен в дозе 0,03 мл/гол, введенный трехкратно внутрь обладает иммуностимулирующими свойствами.

Динамика ауто-РОК у животных на фоне введения феррофена

Результаты изучения динамики ауто-РОК у мышей представлены в таблице 6. При введении феррофена в тече-ние 3-х дней в дозе 0,03 мл/гол интактным мышам, кинетика ауто-РОК характеризовалась повышением абсолютного и относительного количества розеткообразующих клеток в крови мышей и составляла на 5-й день исследования 1321,5±32,3 клеток в 1 мкл крови с последующим понижением до 973,8±16,5 клеток в 1 мкл крови к 15-му дню против 61,2±3,7 клеток в 1 мкл в контроле (таблица 6).

Таблица 6. Динамика ауто-РОК (клеток/мкл)

№ группы	Препарат	Дни исследований
		5	15
1	Феррофен	1321,5±32,3*	973,8±16,5
2	Контроль	71,4±5,7	61,2±3,7

Определение антителообуазуюших клеток. Индекс стимуляции иммунного ответа высчитывали, как отношение числа АОК в селезенке мышей, получивших феррофен, к числу АОК в селезенке мышей контрольной группы. Устано-вили, что феррофен стимулирует АОК в селезенке мышей при иммунизации эритроцитами барана (табл. 7). Так, содержание спленоцитов в селезенке под влиянием феррофена увеличилось в 1,43 раза. Число АОК на всю се-лезенку повысилось в 1,3 раза, на 106 спленоцитов – в 2 раза, что указывают на активацию трансформации В лимфоцитов в АОК селезенки.

Таблица 7. Динамика ауто-АОК (клеток/мкл)

Препарат	Кол-во животных	Доза, мл/гол.	Число спленоцитов на селезенку	Число АОК на всю		Р
				селезенку	на 106 спленоцитов
Феррофен	10	0,03	360,5±28,3	10,27±1,2	38,7±2,8	<0,05
Контроль	10	-	250,8±21,7	7,9±0,28	19,3±1,8

При оценке действия феррофена на гуморальный иммунитет изучали влияние препарата на индуктивную и продуктивные фазы.

Титр гетерофильных агглютининов. Введение феррофена повышало титры антител к тимусзависимому анти-гену – ЭБ и у мышей в сыворотке крови они регистрировались на уровне 3,75-4,3 (Iog2) через неделю после иммунизации, а в контроле были на уровне 2,25-2,4 (Iog2). Более высокий уровень 2gM - 4,3 (Iog2) по сравнению с 2gG - 3,75 (Iog2), говорит о том, что феррофен действует на индуктивную фазу иммунитета, чем на продуктивную.

Кинетика В-лимфоцитов. В опыте на мышах линии BALB/C в динамике относительного количества В-лимфоцитов наблюдали увеличение содержания ЕАС-РОК на 10-15-е дни после введения феррофена до 21,8±1,5-22,7±1,3% по сравнению с контролем 17,8±1,9% (таблица 8).

Таблица 8. Кинетика относительного количества В-лимфоцитов (%) в крови интактных мышей после введения препарата феррофен

№ группы	Доза феррофена	Кратность	10-й день	15-й день
1	0,03 мл/гол.	3	21,8±1,5	22,7±1,3
2	Контроль	-	17,8±1,9	17,3±1,6

Комплексное исследование феррофена показало, что препарат способствует усилению иммунного ответа в течение 15 дней (таблица 8).
4.2. Определение терапевтической дозы феррофена при мониезиозе ягнят

Определение терапевтической дозы феррофена при мониезиозе ягнят проведено в июле на ягнятах 4-5 мес. возраста. Первоначально провели титровку терапевтической дозы феррофена на 30 гол ягнят, спонтанно инвазиро-ванных мониезиями, отобранных на основании результатов копрологических исследований по Фюллеборну. Из ягнят сформировали 7 равных групп. Ягнятам первой группы ввели 0,5% раствор феррофена в дозе 20 мл на гол; второй 10 мл на гол; третьей группе ввели 1% раствор феррофена в дозе 20 мл на гол; четвертой ввели 1,5% раствор феррофена в дозе – 15 мл; пятой – 10 мл; шестой – 1% раствор медного купороса в дозе 20 мл. Ягнята седьмой группы препарат не получали и служили контролем. При копроовоскопическом исследовании фекалий, 100%-ной эффект получили только от дозы 15 мл на голову 1,5% раствор феррофена, а доза 15 мл, равная половине рекомендуемой в инструкции дозы 1%-ного раствора медного купороса дала 80%-ный эффект. Эффективность от доз 10 мл 1% феррофена, 10 и 20 мл 0,5% феррофена на голову была недостаточной. Для определения интенсивности инвазии убили и провели гельминтологическое вскрытие желудочно-кишечного тракта трех ягнят контрольной группы, трех ягнят, получивших 1,5% раствор феррофена в дозе 15 мл на голову и трех ягнят, получивших медный купорос в дозе 30 мл/гол. У контрольных ягнят обнаружили в среднем 1,8 экз., у ягнят, получивших сульфат меди, обнаружили 1 цестоду. У ягнят леченых феррофеном в дозе 15 мл/гол мониезий не обнаруживали (табл. 9).

Клиническое исследование ягнят позволило установить, что животные легко переносили т феррофен, сохраняют аппетит и физиологический статус.
Таблица 9. Результаты гельминтологического вскрытия ягнят

Препарат	Количество гол.	Доза мл/гол.	Обнаружено мониезий, экз.
			М. expansa	М. benedeni
1,5 % феррофен	3	15	0	0
1 % медный купорос	3	20	1	0
Контроль	3	-	3	2

4.3. Эффективность феррофена при спонтанном мониезиозе

Антгельминтную эффективность феррофена определяли в июне-июле на 50 ягнятах текущего года рождения, со средней живой массой 20 кг, спонтанно инвазированных мониезиями (Moniezia expansa и М. benedeni). Животных после взвешивания разделили на 5 равных групп (4 подопытных и одну контрольную). Ягнятам 1, 2 и 3 подопытных групп вводили однократно, индивидуально, внутрь феррофен в дозе соответственно 7, 10, 15 мл/голову; четвертой группе – 1%-ный раствор сульфата меди в дозе 20 мл/гол. Ягнята пятой группы препарат не получали и служили контролем. В период опыта ягнята всех групп выпасались в одной отаре. После дегельминтизации проводили наблюдения за клиническим состоянием животных. Антигельминтную эффективность феррофена учитывали по результатам копроовоскопических исследований методом Фюллеборна до и через 10 дней после назначения препаратов. Расчет эффективности антгельминтика проводили согласно «Руководства, одобренному Всемирной Ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии». Феррофен в дозе 15 мл/ гол показал 100%-ный эффект. При снижении дозы препарата до 7 мл/гол. 6 из 10 леченых животных освободились от мониезий. Количество яиц мониезий в фекалиях снизилось с 369,6±27,5 до 88,6±7,9 в 1 г, т.е. на 76,1%. При снижении дозы до 15 мл/гол. 8 из 10 леченых освободилось от цестод, а количество яиц сократилось с 339 до 46 экз./г фекалий, т.е. на 87%. В опытной группе, где применяли 1% раствор сульфата меди (в дозе 20 мл/гол) из 10 леченых животных освободилось от мониезий 6; количество яиц в фекалиях снизилось на 73,1%. Количество яиц М. expansa и М. benedeni г фекалий молодняка овец контрольной группы в период опыта оставалось примерно на одном уровне (353±24 и 358±27). Следует отметить, что ягнята хорошо переносили препараты. Не отмечено побочного действия феррофена на организм ягнят, как в период дегельминтизации, так и в течение 10 сут. после нее. При гельминтологическом вскрытии тонкого отдела кишечника 5 (выборочно убитых) ягнят из контрольной группы обнаружили в среднем по 2,0±0,4 экз. М. expansa и по 1,2±0,3 экз. М. benedeni. Анализ полученных результатов показал, что феррофен является высокоэффективным цестодоцидом. В опыте же, эффективность сульфата меди в дозе 20 мл/гол оказался невысоким.
4.4. Комиссионные испытания феррофена при мониезиозе ягнят

Комиссионные испытания феррофена проводили в июле-августе на 30 ягнятах 4-5 мес. возраста, средней живой массой 20 кг, спонтанно инвазированных Moniezia expansa и М. benedeni. Феррофен в дозе 15 мл/гол, задали 15 ягнятам первой группы перорально однократно, индивидуально, утром до кормления. Ягнята второй группы (15 гол) служили контролем. При испытании препарата проводили наблюдения за клиническим состоянием ягнят. Эффективность препарата учитывали по результатам копроовоскопических исследований методом Фюллеборна проб фекалий от 15 ягнят подопытной и контрольной групп до и через 10 дней после дачи препарата, а также на основании гельминтологического вскрытия желудочно-кишечного тракта выборочно убитых животных (по 5 голов из группы) через 10 дней после дачи препарата. Ягнята хорошо переносили препарат. Побочного действия феррофена на организм ягнят не отмечено. Через 10 дней после дегельминтизации, яйца мониезий у подопытных ягнят первой группы не находили, во второй - в среднем по 276,0±32,5 экз./яиц в 1г. фекалий Через 10 дней после назначения феррофена результаты опыта оценивали путем убоя животных и гельминтологического исследования кишечников (по 5 ягнят из опытной и контрольной групп). Результаты исследований приведены в таблице 10. По результатам вскрытия кишечника 5 подопытных ягнят мониезии не были обнаружены (ЭЭ и ИЭ = 100%). У контрольных ягнят обнаружено, в среднем, 3 экз. М. expansa и 2 экз. М. benedeni.

Таблица 10. Результаты испытания терапевтической эффективности феррофена при мониезиозе овец (по данным гельминтологических вскрытий)

Группа	Количество животных	Доза препарата мл/гол.	Обнаружено мониезий		ИЭ, %	ЭЭ, %
			М. expansa	М. benedeni
Подопытная	5	15,0	-	-	100	100
Контрольная	5	-	3	2	-	-

Как видно, феррофен показал 100% эффективность при мониезиозе овец при однократном пероральном введении орально в дозе 15 мл/ гол.

4.5. Производственные испытания феррофена

Испытания феррафена в производственных условиях проводили на 420 ягнятах 4-5 мес. возраста, спонтанно инвазированных мониезиями. Препарат задавали ягнятам со средней массой 20 кг в дозе 15 мл/ гол, внутрь, однократно, индивидуально, утром. В качестве контроля отобрали 15 ягнят, которым препарат не давали. Эффективность феррофена учитывали по результатам копроовоскопичеких исследований по Фюллеборну 30 проб фекалий ягнят подопытной и 15 проб контрольной групп до и через 10 дней после назначения. Экстенсивность заражения мониезиями составила 100%. Овоскопия фекалий подопытных овец через 10 дней после назначения феррофена показали, что ягнята полностью освободилось от мониезий, так как фрагментов мониезий и их яиц не обнаружено. В пробах контрольных ягнят, в среднем, обнаружили по 282±26 - 293±28 экз. яиц в 1г. фекалий. При наблюдении за подопытными животными отмечено, что ягнята хорошо переносили препарат. Побочного действия феррофена на организм ягнят не отмечено. Феррофен в дозе 15 мл/гол при однократном индивидуальном введении, по данным копрологических исследований, показал 100%-ную антгельминтную эффективность при мониезиозе ягнят. Препарат хорошо переносится и не вызывает физиологических отклонений по сравнению с контрольными ягнятами.

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИММУНОТРОПНЫХ СВОЙСТВ И ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ДОЗЫ ВЕРМИТОКСА ПРИ МОНИЕЗИОЗЕ ОВЕЦ
5.1. Иммунотропные свойства вермитокса

Изучение иммунотропной активности вермитокса провели в соответствии с «Методическими рекомендациями по экспериментальному изучению иммунотропной активности фармакологических препаратов», одобренными МЗ России (1998 г.). О влиянии вермитокса на клеточное звено иммунитета судили по выраженности реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) и аутологичным розеткообразующим клетками (ауто-РОК).

Реакция гиперчувствительности замедленного типа. У мышей линии BALB/C индекс стимуляции (ИС) был на уровне 4,5±0,3, а в контроле 5,0. Эти данные свидетельствуют об индифферентном отношении Т лимфоцитов (таб-лица 11). Вермитокс в дозе 3,5 мкл/гол, введенный трехкратно внутрь, не угнетает клеточное звено иммунитета.
Таблица 11. Реакция гиперчувствительности замедленного типа

№ группы	Доза препарата	Кратность	ИС
1	3,5 мкл/гол	3	4,5±0,3
2	Контроль	-	2Д

Динамика ауто-РОК у животных на фоне введения вермитокса

Исследования проводили на 5 и 15 дни после назначения препарата. Установлено, что при введении вермитокса в дозе 3,5 мкл/гол в течение 3-х дней интактным мышам, кинетика ауто-РОК характеризовалась некоторым снижением абсолютного и относительного количества розеткообразующих клеток в крови мышей, и составляла на 5-й день исследования 61,4±8,7 клеток в 1 мкл крови с последующим понижением до 51,1±4,4 клеток в 1 мкл крови к 15 му дню против 62,7±3,4 клеток в 1 мкл в контроле (табл. 12).
Таблица 12. Динамика ауто-РОК (клеток/мкл)

№ группы	Препарат	Дни исследований
		5	15
1	вермитокс в дозе 3,5 мкл/гол	61,4±8,7	51,1±4,4
2	Контроль	81,5±8,1	62,7±3,4

следующая страница>