Каталожный номер: 49101 Фасовка: 20 тестов/упаковка

Справка

Грипп является широко распространенной и обычно самолимитирующейся острой респираторной инфекцией. Начало болезни быстрое, основные симптомы: высокая температура, боль в мышцах (миалгия), головная боль, общее недомогание и кашель. Острый период болезни длится в среднем три дня, однако кашель и недомогание могут оставаться в течение нескольких недель. Пожилые люди и пациенты с хронической легочной и сердечной болезнью имеют наибольший риск осложнений, включая вирусную и бактериальную пневмонию, средний отит, синусит и обострение хронических респираторных заболеваний (1). Болезнь чрезвычайно заразна, поскольку вирус распространяется воздушно-капельным путем. Вирусы гриппа принадлежат к семейству Orthomyxoviridae, один род которого, имеющий название грипп, имеет три подтипа (А, В и С) (2). Два подтипа, А и В, вызывают тяжелую инфекцию у людей: грипп А является наиболее распространенной и более тяжелой болезнью. Амантадин хлоргидрат и в последнее время ремантадин являются эффективными лекарственными средствами при лечении инфекции. А вакцинация остается наиболее эффективным профилактическим мероприятием. Вирус состоит из ассоциированной с нуклеопротеином РНК(-),образующей спиральную структуру (нуклеокапсид) и конверт, состоящий из углеводов, липидов и белков, которые формируют четыре антигена, гемагглютинин и нейраминидазу, нуклеокапсид и матрицу (3). Антигенные различия гемагглютинина и нейраминидазы, антигенов гриппа А, обеспечивают основу их классификации на подтипы (ex. A/Hong Kong/1/68/ (H3N2)). Эпидемическая природа болезни объясняет, почему произошли несколько эпидемий, начиная с 19 столетия. Наиболее известная эпидемия гриппа случилась в 1918-1919 гг. и получила название «Испанский грипп». Также пандемии происходили в 1932-1933, 1947-1948, 1957 и 1968 г. В непандемические годы от 10000 до 20000 людей умирают от гриппа только в США, а при пандемии может происходить свыше 100000 смертей (4). Анализ изолятов вируса показал их широкую изменчивость благодаря сдвигу в антигенах гемагглютинина.

Предназначение и принцип метода

Качественный скрининговый иммунохроматографический экспресс-тест для определения вируса гриппа В в носоглоточных выделениях. В методе используется уникальная комбинация окрашенного коньюгата мышиных моноклональных антител к вирусному антигену и иммобилизованных в тестовой области мембраны других мышиных моноклональных антител к вирусному антигену для специфического определения вируса гриппа В с высокой степенью чувствительности и специфичности. После получения материала и его обработки, несколько капель растворенного образца вносят в стартовую лунку тестовой кассеты. По мере того как образец продвигается по мембране цветной коньюгат антител к вирусным антигенам связывается с антигенами, если последние присутствуют в пробе, образуя комплекс антиген-антитело. Этот комплекс связывается с иммобилизованными в тестовой зоне другими специфическими антителами, образуя полосу розово-красного цвета. При отсутствии в пробе вирусных антигенов цветная полоса не образуется. Вне зависимости от результата теста несвязанный конъюгат, продолжая продвигаться по слою адсорбента, достигает контрольной зоны, где осаждается с образованием контрольной полосы, подтверждающей качественность применяемых в тесте реагентов. Качественный результат теста считывается визуально.

Состав

Тестовые кассеты 20

Тампоны 20

Пробирки с фильтрующими крышками 20

Экстрагирующий раствор во флаконе-капельнице, 11 мл 2

Инструкция 1

Стабильность и хранение

1. Хранить при температуре от 4 до 30°C в герметично закупоренной фабричной упаковке.

2. Не замораживать!

3. Тест стабилен до истечения срока хранения, указанного на этикетке.

Меры предосторожности

Данный тест предназначен только для диагностики in vitro и профессионального применения.

При работе с пробами пользоваться защитной одеждой и одноразовыми перчатками.

Не принимать пищу, не пить и не курить в помещении, где выполняется работа с пробами.

При взятии и тестировании проб не прикасаться руками к слизистой оболочке глаз и носа.

Внимательно прочитать инструкцию перед проведением теста.

Не использовать тестовую кассету, если её защитная упаковка повреждена.

Не использовать тестовую кассету с истекшим сроком хранения.

Обезвреживание отходов

Все пробы следует считать потенциально инфекционными. После завершения процедуры тестирования утилизировать пробы следует с осторожностью и только после стерилизации в автоклаве или обработки 0,5 – 1% раствором гипохлорита натрия не менее 1 часа.

Подготовка реагента

Все реагенты готовы к использованию.

Исследуемые образцы

Экстракты аспирата и мазков из носоглотки.

Взятие и подготовка проб

1) Предварительные замечания

Вирусы гриппа В выделяются почти исключительно из дыхательных путей. Выделения можно получать либо путем аспирации через катетер, либо всасыванием с помощью резиновой груши. Мазки из носоглотки или горла также могут быть использованы, но они несколько уступают аспирационным образцам.

Если анализ проб не проводится немедленно, нужно хранить мазки в чистом сухом контейнере (не поставляется с набором) при температуре +2-8°C, и провести анализ в течение 24 часов. Не используйте для хранения образцов никаких сред.

2) Образец аспирата из носоглотки

- После сбора с использованием подходящей процедуры добавьте 0,5 мл аспирата и 0,5 мл (12 капель) экстрагирующего раствора в фильтр-пробирки.

- С помощью автоматической пипетки хорошо смешайте смесь.

- Закройте колпачком фильтр-пробирки и оставьте для экстракции на 15 минут.

3) Образец мазка из носоглотки

- Используйте тампоны с дакроновым или районовым покрытием.

Не используйте тампоны с хлопковым или кальций-альгинатным покрытием, с деревянными или угольными стержнями и транспортные среды с агаром или желатином.

• 
  -Соберите пробу из носоглотки или горла, используя соответствующий тампон.
  
• 
  -Сразу же после сбора погрузить тампон в фильтр-пробирки с 1 мл (25 каплями) экстрагирующего раствора и энергично помешать в течение 10 секунд, чтобы обеспечить хорошее смешивание.
  
• 
  -Провести экстракцию в течение 15 минут.
  
• 
  -В конце тщательно отжать жидкость из тампона, выжимая тампон о стенки пробирки.
  
• 
  -Утилизировать тампон в соответствии с правилами утилизации инфекционных агентов (см. раздел "Меры предосторожности").
  
• 
  -Закройте фильтр-пробирку крышкой.
  

Процедура тестирования

1. 
   Довести все пробы и тестовые кассеты до комнатной температуры.
   
2. 
   Извлечь тестовую кассету из защитной упаковки, оторвав край упаковки по надрезу.
   
3. 
   Пометить тестовую кассету фамилией или кодовым номером пациента.
   
4. 
   Внести по капле 6-7 полных капель (200 мкл) экстракта из фильтр-пробирки в лунку для проб на тестовой кассете, давая впитываться предыдущей капле.
   
5. 
   Считать результаты теста через 15 минут после внесения пробы.
   

НЕ ИНТЕРПРЕТИРОВАТЬ РЕЗУЛЬТАТЫ ПОСЛЕ 15 МИНУТ ВЫДЕРЖКИ.

Интерпретация результатов

Негативный

Появляется только одна окрашенная полоса в контрольной зоне (С).

Позитивный

Кроме контрольной полосы появляется также вторая цветная полоса в тестовой зоне.

Неопределённый: Если в контрольной зоне не появилось чёткой цветной полосы, тест считается не прошедшим контроль качества. В этом случае рекомендуется повторить его, взяв новую тестовую кассету.

Характеристики теста

а) Чувствительность

Чувствительность теста была определена с использованием двух вирусных штаммов гриппа В: B/Hong Kong 5/72, B/Qingdao/102/91, B/Victiria/504/00 и B/Tokio/53/99, по сравнению с коммерческим эталонным экспресс-тестом. Было обнаружено, что чувствительность данного теста была одинаковой с чувствительностью эталонного экспресс-теста, т.е. 25 нг/мл для штамма B/Hong Kong 5/72, 50 нг/мл для штамма B/Qingdao/102/91, 500 нг/мл для штамма B/Victiria/504/00 и 25 нг/мл для штамма B/Tokio/53/99.

б) Специфичность

Исследование было выполнено с использованием следующих двух вирусных штаммов гриппа А: A/Panama/2007/99/H3N2 и A/Taiwan/1/86/H1N1. Данный тест показал постоянные отрицательные результаты вплоть до 10 мкг/мл для каждого штамма.

в) Воспроизводимость

Внутрисерийная

Исследование было выполнено в 3 дублях на пяти образцах, содержащих 0; 12,5; 25; 50 и 100 нг/мл вируса гриппа В. Отрицательные и положительные значения были правильно определены в 100% случаев.

Межсерийная

Исследование было выполнено на тех же самых пяти образцах с помощью тестов из 3 лотов. Отрицательные и положительные значения были правильно определены в 100% случаев.

Ограничения метода

1. Как и для других диагностических процедур, врач должен интерпретировать результат теста в свете другой клинической информации о пациенте.

2. Положительный результат теста не исключает наличия других патогенов.

3. Негативные результаты могут быть получены в образцах с очень низкой концентрацией вируса. Если клинические симптомы сохраняются, результат необходимо подтвердить методом клеточной культуры или повторить тестирование со свежим образцом.

Литература

1. Demicheli, V., Rivetti, D., Deeks J.J. Jefferson, T.O. (2000).Vaccines for preventing influenza in healthy adults. Cochrane Database of Systematic Reviews. Cochrane Library 2000 (Issue 4).

2. Fleury, H.J.A (2001). Les virus Influenza (virus de la grippe) in Virologie humaine 3ème édition (Masson, Paris). 72 – 78.

3. Influenza viruses (2007). Website : https://virology-online.com/viruses/Influenza.htm.

4. Parker, A.S. Jr and Bradley, S.B. (2001). Website: https://cme.ufl.edu/media/flu/index.htmL.
Соблюдать температуру хранения Читать инструкцию Не использовать повторно Только для in vitro диагностики