Открытие дионина

1. Реакции с реактивами Марки, Манделина и Фреде. Дионин дает цветные реакции с реактивами Манделина (зеленый), Марки (синий, переходит в сине-фиолетовый) и Фреде (зеленый, переходит в синий).

Методика выполнения реакции. Такая же как и для морфина.

2. Реакция с меркурий (ІІ) хлоридом. Дионин с меркурий (ІІ) хлоридом дает тонкие бесцветные призматические кристаллы.

Методика выполнения реакции. На предметное стекло наносят несколько капель хлороформного извлечения из трупного материала или несколько капель исследуемого раствора. Эти жидкости выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют каплю 0,1 моль/л раствора хлоридной кислоты и каплю 2 %-го раствора ртути (II) хлорида. При наличии дионина в исследуемых жидкостях через несколько минут появляются тонкие бесцветные призматические кристаллы.

3. Открытие дионина за этокси-группой. При действии некоторых окислителей на вещества, в состав которых входит этокси-группа, она отщепляется от молекул и окисляется до альдегида ацетатной кислоты. Этот альдегид с морфолином и натрий нитропрусидом дает синий цвет.

Методика выполнения реакции. В микропробирку вносят 4-6 капель исследуемой жидкости, которую на водном нагревателе выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют каплю раствора калий дихромата (1 г калий дихромата растворяют в 60 мл воды и осторожно прибавляют 7,5 мл концентрированной сульфатной кислоты). Пробирку накрывают куском фильтровальной бумаги, смоченной смесью растворов морфолина и натрий нитропруссида. Потом пробирку нагревают на водном нагревателе. При наличии дионина в пробе на фильтровальной бумаге возникает синее пятно. Граница открытия - 0,2 мг дионина в пробе.

4. Открытие дионина методом хроматографии. Для открытия дионина используют метод хроматографии в тонком слое силикагеля, закрепленном гипсом. С этой целью используют систему растворителей, которая состоит из диэтиламина, диметилформалина, этилового спирта и этилацетата в соотношении 2:5:20:75. Пятна дионина на пластинках проявляют реактивом Драгендорфа, модифицированным за Мунье. Под влиянием этого реактива пятна дионина на хроматограмме окрашиваются в желто-бурый цвет.

5. Открытие дионина по УФ-спектру. Дионин в 0,1 моль/л растворе сульфатной кислоты имеет максимум поглощения при 285 нм и изгиб при 277 нм.
Открытие героина

1. Реакции с реактивами Манделина, Марки и Фреде. С этими реактивами героин дает такие же реакции, как и морфин. В состав этих реактивов входит концентрированная сульфатная кислота, которая гидролизирует героин с образованием морфина и ацетатной кислоты. Морфин, который образовывается при этом, дает реакции с реактивами Манделина, Марки и Фреде. Поэтому эти реакции не специфические для открытия героина. Героин с реактивом Манделина дает фиолетовый цвет, с реактивом Марки - красный, который переходит в фиолетовый, с реактивом Фреде - фиолетовый, который переходит в грязно-зеленый, а потом в розовый.

2. Реакция образования этилацетата.

Методика выполнения реакции. К нескольким кристалликам исследуемого вещества или к сухому остатку (около 50 мг), полученному после выпаривания извлечения из биологического материала, прибавляют 1 мл этилового спирта и 2 мл концентрированной сульфатной кислоты. На протяжении 3-5 мин. смесь нагревают на кипящем водном нагревателе. При наличии героина в пробе ощущается запах этилацетата. Эта реакция малочувствительная, но специфическая для открытия героина, ее не дают морфин и его производные (кодеин, дионин).

Чтобы доказать, что ацетильная группа от героина, а не от любого другого соединения, необходимо выполнить реакции на морфин, который выделяется из героина во время кислотного гидролиза. Для этого выполняют реакции на морфин, описанные выше.

3. Метод хроматографии. Для открытия героина применяют метод хроматографии в тонком слое силикагеля. Для этого используют систему растворителей, которая состоит из ацетонитрила, этилового спирта, воды и ацетатной кислоты в соотношении 50:50:50:5. Пятна героина на хроматограмме проявляют реактивом Драгендорфа, модифицированным за Мунье.

4. Открытие героина по УФ- и ИК-спектрам. Героин, растворенный в этиловом спирте, имеет максимум поглощения при 281 нм. Раствор героина в 0,1 моль/л растворе хлоридной кислоты имеет максимум поглощения при 278 нм, в 0,5 моль/л растворе натрий гидроксида - при 298 нм, а в 0,05 моль/л растворе сульфатной кислоты - при 179 нм.

В ИК-области спектра героин имеет основные пики при 1765, 1740, 1450, 1370 и 1180 см^-1.

Открытие промедола

В химико-токсикологическом анализе для открытия промедола применяют химические реакции, методы хроматографии и спектроскопии.

1. Реакция с реактивом Марки. При добавлении реактива Марки к промедолу появляется пурпурово-красный цвет, который потом переходит в коричнево-фиолетовый.

Методика выполнения реакции. Такая же как для морфина.

2. Реакция с пикриновой кислотой. При взаимодействии промедола с пикриновой кислотой образуется желтый осадок.

Методика выполнения реакции. см. занятие № 6 открытие атропина.

3. Метод хроматографии. Для открытия промедола применяют метод хроматографии в тонком слое силикагеля КСК, закрепленном гипсом. Для хроматографирования используют систему растворителей, которая состоит из ледяной ацетатной кислоты и метилового спирта в соотношении 1:9. Пятна промедола на хроматограмме проявляют реактивом Драгендорфа, модифицированным за Мунье.

4. Открытие промедола по УФ-спектру. Промедол в 0,05 моль/л растворе сульфатной кислоты имеет максимум поглощения при 242, 247 и 257 нм.

Оптические методы анализа

1. Количественное определение аминазина фотоколориметрическим методом. В пробирку с притертой пробкой вносят 1 мл предварительно очищенного водного сульфатнокислого раствора экстракта из органов трупа (сухой остаток после удаления органического растворителя обрабатывают 0,25 моль/л раствором Н₂SO₄), туда же прибавляют 6 мл концентрированной сульфатной кислоты (осторожно каплями) при постоянном перемешивании жидкости и охлаждении ледяной водой. Смесь нагревают на протяжении 10 мин на кипящем водняной бане, после чего охлаждают до комнатной температуры и измеряют оптическую плотность окрашенного в розовый цвет раствора (светофильтр - зеленый, кювета длиной 5 мм, раствор сравнения - смесь реактивов или “слепой” опыт с экстрактом, который не содержит аминазина). По градуировочному графику зависимости оптической плотности от концентрации находят количество аминазина в анализируемом объеме пробы экстракта.

Для построения градуировочного графика в пробирки вносят по 1 мл аминазина с содержанием 20, 40, 60, 80, 100 ... 300 мкг/мл и дальше делают, как описано выше, как раствор сравнения используют смесь реактивов (1 мл 0,25 моль/л раствора сульфатной кислоты с 6 мл концентрированной сульфатной кислоты).

2. Количественное определение анальгина фотоколориметрическим методом

Микропипеткой отбирают 0,2-0,5 очищенного экстракта эквивалентного 0,2-0,5 г органа, вносят в колбу емкостью 25 мл, прибавляют 1 мл воды, потом последовательно - 6 мл 70% раствора ацетатной кислоты, 2 мл 2% хинона в 70% ацетатной кислоте и 1 мл воды. Смесь взбалтывают после добавления каждого реактива. Через 4 мин измеряют оптическую плотность с помощью фотоэлектроколориметра (светофильтр зеленый, кювета с толщиной слоя 10 мм). Раствором сравнения является смесь реактивов или “слепой” опыт с биологическим материалом, который не содержит анальгина.

Для построения градуировочного графика в колбы емкостью 25 мл вносят по 0,1; 0,2; 0,3; ...; 0,8; 0,9; 1 мл водного раствора анальгина, который содержит в 1 мл 1 мг данного вещества, потом прибавляют воду до 1 мл и дальше поступают согласно выше описанной методике.

Методика количественного определения пригодна для объектов, которые не подверглись гниению. Чувствительность метода 20 мг анальгина в 100 г органа, точность определения ± 7,7% в анализируемой пробе.

3. Количественное определение промедола экстракционно-фотометрическим методом

Сухой остаток, полученный после удаления органического растворителя, обрабатывают 10 мл хлороформа и количественно переносят в делительную воронку, куда прибавляют 1 мл дистиллированной воды, 9 мл ацетатного буфера (рН 4,6) и 5 мл 0,1% водного раствора тропеолина 00. Содержимое делительной воронки взбалтывают 5 мин, отстаивают 10 мин и отделяют хлороформную фазу. Экстракцию хлороформом (по 5 мл) повторяют до тех пор, пока 3-4 капли последнего хлороформного извлечения не перестанут давать цвет с 1-2 каплями 1% раствора сульфатной кислоты в метаноле или абсолютном этаноле. Хлороформные извлечения объединяют и фильтруют через сухой фильтр в мерную колбу на 50 мл, доводят хлороформом до метки. К 5 мл полученного экстракта прибавляют 20 мл хлороформа и 25 мл 1% раствора сульфатной кислоты в метаноле или абсолютном этаноле. Смесь взбалтывают и определяют оптическую плотность окрашенного в фиолетово-красный цвет раствора с помощью фотоэлектроколориметра (светофильтр зеленый, 550 нм, кювета с толщиной слоя - 10 мм). Раствор сравнения - опыт с экстрактом из биологического материала, который не содержит промедола, и реактивами.

Для построения градуировочного графика в делительные воронки вносят 0,05; 0,1; 0,3; 0,5; 0,7; 0,9 и 1 мл стандартного раствора, который содержит 2,0 мг/мл промедола. В первые шесть воронок прибавляют воду до 1 мл, во все вносят по 9 мл ацетатного буфера, 5 мл раствора тропеолина 00 и потом действуют, как описано выше.

4. Количественное определение барбитуратов методом спектрофотометрии в УФ-области.

К сухому остатку, который получили при выпарывании извлечения, прибавляют 5 мл воды.

После растворения сухого остатка полученный раствор фильтруют, потом к фильтрату прибавляют 1 каплю 2 моль/л раствора аммиака (рН 10) и снимают спектр поглощения. При этом 5,5-замещенные (барбитал, барбамил, фенобарбатал, этаминал натрия) и 1,5,5-замещенные (гексенал) барбитуровой кислоты имеют максимум поглощения при длине волны около 240 нм. Потом к этому раствору прибавляют 1-2 капли раствора сульфатной кислоты (рН 2) - максимум поглощения 5,5- и 1,5,5-замещенных барбитуровой кислоты исчезает. После добавления к этим растворам 1-2 капель 4 моль/л раствора гидроксида натрия (рН 13) появляется максимум поглощения для 5,5-замещенных этой кислоты - при 255 нм, а для 1,5,5-замещенных барбитуровой кислоты при 240 нм.

Удельный показатель светопоглощения для фенобарбитала составляет 380.

Максимумы поглощения и удельные коэффициенты исследуемых веществ в

0,1 моль/л растворе сульфатной кислоты

Вещество	Светопоглощение (, нм)	Вещество	Светопоглощение (, нм)
Бруцин	265 (328) 300(219)	Кокаин	254 (880), 230(588)
Ацетилсалици-ловая кислота	229 (484)	Салициловая кислота	302
Атропин	252, 258, 264	Новокаин	228, 272, 279
Аминазин	254 (880), 230 (588)	Папаверин	250,254,310
Эфедрин	251,256,262	Хинин	250,316,346
Кодеин	272 (в 0,1 моль/л растворе НСl)	Хлордиазе-поксид	245, 306
Антипирин	230,259,265	Морфин	284

<предыдущая страница | следующая страница>